小脳低形成を合併したB細胞欠損症の遺伝子解析

B细胞缺陷并发小脑发育不全的遗传分析

• 批准号: 08877122
• 负责人: 久保田 雅也
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08877122/
• 关键词: 小脳低形成; B細胞欠損症; PAX5遺伝子; 汎血球減少症; アポトーシス; PCR-SSCP法; B細胞分化; Pax5遺伝子; 無ガンマグロブリン血症; B細胞欠損

小脳低形成、胎児発育遅延、進行性汎血球減少及び易感染性を示した先天性B細胞欠損症の乳児の検体を用いて、ヒトB細胞の初期分化を制御するPAX5遺伝子(BSAP)とE2A遺伝子の検討、B細胞分化抗原の検討およびアポトーシスの検討を行った。末梢血と骨髄血よりDNAとRNAを抽出し、サザンブロッティング、ノーザンブロッティング、PCR-single strand conformation polymorphism(SSCP)法でPAX5遺伝子の異常の検出を行ったが、発現異常は認められなかった。PAX5とE2A遺伝子の発現をreverse transcriptase(RT)-PCR法で検討したが、異常はみられなかった。CD34,CD10,lamda-like,TdT,mbl,B29等のB細胞の早期に発現する分化遺伝子群の発現の検討も抗体を用いて行ったが、これらの骨髄細胞における発現はほとんどみられず、B細胞の発生の初期における異常が示唆された。免疫グロブリン遺伝子の再構成はみられなかった。また、本人とその家族の末梢血よりEBウイルス感染B細胞株を樹立を試みたが、繊維芽細胞の株は樹立できたが、B細胞株の増殖はみられず樹立できなかった。今後アポトーシスとの関連を調べるため、末梢血と骨髄血を用いて、Fas,Fas-リガンド,p53,Bcl-2,BAXなどの遺伝子産物を蛋白レベルでの発現を検討する予定である。さらに、症例に認められた多系統の発生異常(小脳低形成、B細胞欠質など)は胎生期組織特異的な細胞アポトーシスの分子機構に基づくことを明確にするため、caspase8、caspase9、caspase10の検討を行っているところである。

The development of breast milk models for congenital B cell impairment, delayed fetal development, progressive pancytopenia, and high susceptibility to infection, PAX5 gene (BSAP), E2A gene, B cell differentiation antigen, and dysregulation of early B cell differentiation are discussed. DNA and RNA were extracted from peripheral blood, and PCR-single strand conformation polymorphism(SSCP) was used to detect PAX5 gene abnormalities. PAX5 and E2A gene detection by reverse transcriptase(RT)-PCR CD34, CD10,lamda-like,TdT,mbl,B29, etc. are used in the early development of B cells. The immune system is not immune. The peripheral blood of my family is infected with B cell lines. Future studies on the relationship between protein expression, peripheral blood and bone marrow protein expression, Fas,Fas-1,p53,Bcl-2,BAX protein expression are expected. In this case, we recognize multiple systemic abnormalities (low cell formation, B cell quality) and molecular mechanisms specific to fetal tissues, such as caspase8, caspase9 and caspase10.