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ヒト腫瘍低酸素細胞の放射線抵抗性の分子メカニズム

人肿瘤缺氧细胞放射抗性的分子机制

基本信息

批准号：
09877170
负责人：
松本英樹
金额：
$ 0.51万
依托单位：
福井医科大学
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09877170/
关键词：
iNOS NO p53 hsp thermosensitivity radiosensitivity glioblastoma

项目摘要

申請者は本助成により、先ず細胞培養環境を実験装置或いは物理的処理によらずに低酸素環境にする手法を各種ヒト神経膠芽腫細胞を用いて検討し、一酸化窒素(NO)産生細胞と非産生細胞の共存培養を発案、樹立した。その系を用いて低酸素環境に置かれたNO非産生細胞のNOを介した細胞間シグナル伝達系およびp53蛋白質をキ-蛋白質とする細胞内シグナル伝達系の動態等を解析し、以下のことが解明された。(1)誘導型一酸化窒素合成酵素(iNOS)の放射線および温熱による誘導発現は変異型p53遺伝子保有細胞においてのみ観察され、NOの放出による亜硝酸塩・硝酸塩の培地内濃度の上昇がみられた。この培地中の亜硝酸塩・硝酸塩濃度の上昇はNOSの特的阻害剤であるアミノグアニジン存在下において抑制され、培地中の亜硝酸塩・硝酸塩濃度の上昇はiNOSの誘導に起因することが確認された。(2)NO産生細胞と共存培養された(低酸素環境に置かれた)野生型p53遺伝子保有非NO産生細胞において、野生型p53蛋白質およびhsp72ストレス蛋白質の蓄積誘導が観察され、NO(低酸素環境)を介する細胞間シグナル伝達系とp53およびhsp72蛋白質の蓄積誘導のための細胞内シグナル伝達系の連動現象が見出された。この非NO産生細胞におけるNOを媒体とする細胞間シグナル伝達系を介した細胞内シグナル伝達系によるp53およびhsp72蛋白質の蓄積誘導はiNOSの特的阻害剤であるアミノグアニジン存在下において抑制され、p53およびhsp72蛋白質の蓄積誘導はiNOSの誘導およびそれに伴うNO産生に起因することが確認された。(3)変異型p53遺伝子保有NO産生細胞を10時間培養した培養液中での野生型p53遺伝子保有非NO産生細胞の放射線感受性および温熱感受性は、通常の培地中でのそれらに比べ抵抗性を示し、NO等の産生による微小環境変化により放射線および温熱に対する細胞致死感受性が修飾される可能性が示峻された。

The applicant has developed a cell culture system or a physical treatment system, and has developed and established a culture system for various kinds of glial cells. The analysis of the dynamics of NO production in non-NO-producing cells, intracellular protein production and p53 protein production in low acid environments, as well as the analysis of NO production in non-NO-producing cells and intracellular protein production in low acid environments, are described below. (1)Induction of iNOS by radiation and heat, induction of isoform p53 gene in cells, detection of NO emission, and increase of nitric acid and nitric acid concentrations in culture. The increase of nitric acid and nitric acid concentration in the culture medium was inhibited by the presence of special inhibitor NOS, and the increase of nitric acid and nitric acid concentration in the culture medium was confirmed as the cause of iNOS induction. (2)NO Production of cells and blue shift culture (low acid environment) wild-type p53 gene maintained in non-NO-producing cells, wild-type p53 protein and hsp72 protein accumulation induced by observation, NO(low acid environment) mediated intercellular expression system and p53 protein and hsp72 protein accumulation induced by intracellular expression system linkage phenomenon was observed. This is a confirmation of the role of intracellular NO production in the induction of accumulation of p53 and hsp72 proteins in non-NO-producing cells, and the role of inhibition of accumulation of p53 and hsp72 proteins in the induction of iNOS in the presence of NO production. (3)Wild type p53 gene retained radiation sensitivity and heat sensitivity of non-NO producing cells in culture medium for 10 days, while in normal culture medium, there was a high possibility of modification of cell lethal sensitivity to radiation and heat due to microenvironmental changes in NO production.