有機熔媒系を用いる酵素的ラジカル反応の制御に関する基礎的研究

有机溶剂体系控制酶自由基反应的基础研究

• 批准号: 09876046
• 负责人: 桑原 正章
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09876046/
• 关键词: 木材腐朽菌; Phanerochaete chrysosporium; Bjerkandera adusta; リグニン分解酵素; リグニンペルオキシダーゼ; マンガンペルオキシダーゼ; 化学修飾酵素; 有機溶媒

木材腐朽作用を持つ担子菌、Phanerochaete chrysosporiumおよびBjerkandera adusta(やけいろたけ)の培養液からリグニン分解酵素であるリグニンペルオキシダーゼ(以下LiP)およびマンガン(II)ペルオキシダーゼ(以下MnP)を分離し、イオン交換クロマトグラフィーおよびHPLCにより精製した。先ず、LiPについて、2,3-ジメトキシンベンジジンを基質として各種の水混和性有機溶媒中での反応を行い、エチレングリコール中で水中よりも高い活性を認めた。また、他のグリコール類やアセトン中でも高い活性が保持されることを認めた。また、これらの溶媒中でグアイアコールなど、他の基質の酸化反応が起こることも確認された。有機溶媒中での反応は、基質のイオン化ポテンシャルや親媒性、溶媒の溶媒和などに影響を受けることが示された。一方、LiP蛋白の遊離のアミノ基を化学的にアセチル化、ベンジル化およびMPSS化して得た化学修飾LiPは、グリコール中では非修飾酵素よりも高い活性を示した。ついで、リグニンモデルポリマー(DHP)を合成し、LiPによるアセトン-メチルセルロソルブ中での分解を検討した。その結果シナピル型DHPは分解されず、むしろ高分子が生じが、シリンジル型DHPは低分子化され、特にアスコルビン酸などのラジカル消去剤の存在下では分解が促進されることが分かった。さらに、MnPについても有機溶媒中での反応を試み、LiP反応との相違を検討した。

The culture solution of Basidiomycetes, Phanerochaete chrysosporium and Bjerkandera adusta(), which plays a role in wood decay, is used to separate and refine the decomposing enzymes from the enzyme "(II)(II)" In the first place, LiP, 2,3-triphenyl ether, and organic solvents, the reaction and activity in water are highly recognized. In addition, the high activity of the two groups is maintained. In addition, it is confirmed that the acid reaction of other substrates is initiated in the solvent Organic solvent reaction, matrix reaction, affinity, solvent reaction and solvent reaction The free radical of LiP protein is chemically modified, and the enzyme activity is high. The solution of the problem is discussed. As a result, the decomposition of DHP is promoted in the presence of a high molecular weight agent, a low molecular weight agent, and a special agent. In this paper, MnP and LiP are discussed.

项目成果

S.Yoshida, T.Watanabe, M.Kuwahara et al: "Preparation of synthetic lignin by manganese peroxidase of Bjerkandera adusta in organic solvents" Holzforschung. (印刷中). (1998)

S. Yoshida、T. Watanabe、M. Kuwahara 等人：“在有机溶剂中通过 Bjerkandera adusta 的锰过氧化物酶制备合成木质素”（出版中）。

Y.Nakamura, T.Sawada, M.Kuwahara et al: "Lignin peroxidase production by Phanerochaete chrysosporium immobilized on polyurethane foam" Journal of Chemical Engineering of Japan. 30巻. 1-6 (1997)

Y.Nakamura、T.Sawada、M.Kuwahara 等人：“固定在聚氨酯泡沫上的黄孢原毛毛菌生产木质素过氧化物酶”，日本化学工程杂志 30. 1-6 (1997)。

S.Yoshida, T.Watanabe, Y.Honda, M.Kuwahara: "Effect of water-miscible organic solvents on the rcasction of lignin peroxidase of Phanerochaete chrysosporium" Jounal of Molecular Catalysis B:Enzymatic. 2巻. 243-251 (1997)

S.Yoshida、T.Watanabe、Y.Honda、M.Kuwahara：“与水混溶的有机溶剂对黄孢原毛平革菌木质素过氧化物酶分解的影响”《分子催化杂志》B：酶学。 1997）