性フェロモン構成成分およびDNA塩基配列比較によるキンウワバ亜科の系統解析

通过比较性信息素成分和 DNA 碱基序列对 Corinthinae 亚科进行系统发育分析

• 批准号: 08760041
• 负责人: 野村 昌史
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08760041/
• 关键词: キンウワバ亜科; 性フェロモン; 野外誘引試験; PCR法; ダイレクトシークエンス; 分子系統解析; チトクロームオキシダーゼ

フェロモン成分の同定により、形態的には極めて近縁とされるキクキンウワバとネッタイキクキンウワバについては主成分が異なるという強い生殖隔離が明らかとなった。また野外でのフェロモントラップによる誘引試験を北海道、関東、沖縄で行ったところ、混生している沖縄地方においても両種が同じ成分に誘引されることはなく、強い生殖隔離が確認された。更にアロザイムやミトコンドリアDNAの制限酵素断片長多型といった生化学的手法を用いて両種の類縁関係を検討したこところ、やはり遺伝的に大きく異なるという結果が得られた。チトクロームオキシダーゼ領域の塩基配列比較については、PCR産物のダイレクトシークエンスを行い、大腸菌を用いてのクローニングは行わずに研究を進めた。より簡便な手法により個体数・種類数を増やすためであり、個体数を多くすることによって塩基配列の確認を行った。PCR産物にイソプロパノールと酢酸アンモニウムを併用した処理を行い、シークエンスを行ったところ、300〜500塩基の配列を明らかにすることができた。これまでに明らかとなっているショウジョウバエなどの領域と比較したところ、確かに目的の領域の一部の配列を示していることが確認された。試薬などの関係でこれ以上の配列を確認することができなかったが、種間の比較については変異が蓄積している領域であったため、解析を行うことができた。キンウワバ類5種の配列を比較検討したところ、キクキンウワバとネッタイキクキンウワバが配列が異なる傾向が見られ、これまでの生化学的手法の結果および本研究によるフェロモン成分の結果を支持した。以上得られた成果について学会の大会で報告を行う予定である。今後は更に多くの種のフェロモン成分を明らかにするとともに、DNA塩基配列情報を蓄積し、亜科内の種の分子系統学的研究を行っていく予定である。

フ ェ ロ モ ン composition の with fixed に よ り, shape of に は extremely め て nearly try と さ れ る キ ク キ ン ウ ワ バ と ネ ッ タ イ キ ク キ ン ウ ワ バ に つ い て は principal component が different な る と い う い strong reproductive isolation が Ming ら か と な っ た. ま た wild で の フ ェ ロ モ ン ト ラ ッ プ に よ る decoys test を Hokkaido, masato east, blunt 縄 で line っ た と こ ろ, mixed し て い る blunt 縄 place に お い て も struck with じ が composition に decoys さ れ る こ と は な く, strong い reproductive isolation が confirm さ れ た. More に ア ロ ザ イ ム や ミ ト コ ン ド リ limitations ア の DNA enzyme breaks running more と い っ た biochemical technique を with い て struck a の class try masato is を beg し 検 た こ と こ ろ, や は り heritage 伝 に big き く different な る と い う results ら が れ た. チ ト ク ロ ー ム オ キ シ ダ ー ゼ field の salt base with column is に つ い て の は, PCR products ダ イ レ ク ト シ ー ク エ ン ス を い, coliform を with い て の ク ロ ー ニ ン グ は line わ ず を に research into め た. Simple よ り な gimmick に よ り individual number, species number を raised や す た め で あ り, individual number を more く す る こ と に よ っ て salt base line with column の confirm を っ た. PCR products に イ ソ プ ロ パ ノ ー ル と boggy acid ア ン モ ニ ウ ム を and し た 処 を line い, シ ー ク エ ン ス を line っ た と こ ろ, 300 ~ 500 salt base の match column を Ming ら か に す る こ と が で き た. こ れ ま で に Ming ら か と な っ て い る シ ョ ウ ジ ョ ウ バ エ な ど と の field comparative し た と こ ろ, indeed か に purpose の a の の field match column を shown し て い る こ と が confirm さ れ た. Try 薬 な ど の masato is で こ れ の match column above を confirm す る こ と が で き な か っ た が, interspecific の comparison に つ い て は - different が accumulation し て い る field で あ っ た た め, analytical を う こ と が で き た. キ ン ウ ワ バ class five の match column を compare beg し 検 た と こ ろ, キ ク キ ン ウ ワ バ と ネ ッ タ イ キ ク キ ン ウ ワ バ が match column が different な る tend to see が ら れ, こ れ ま で の biochemical technique の results お よ び this study に よ る フ ェ ロ モ ン composition の results を support し た. The above られた results に に られた て て て て report of the congress of the society を う う approved である. Future は に く more の kind の フ ェ ロ モ ン composition を Ming ら か に す る と と も に, DNA salt base with column intelligence を accumulation of の し, 亜 の molecular systematics を line っ て い く designated で あ る.

项目成果

島田玲子・安藤哲・野村昌史他: "キクキンウワバ性フェロモンの合成および野外誘引試験" 日本農芸化学会1997年度大会講演要旨. 259- (1997)

Reiko Shimada、Satoshi Ando、Masashi Nomura等：《Kikukkin性信息素的合成和场吸引试验》日本农业化学学会1997年年会摘要259-（1997）。

野村昌史・上原さとみ・安藤哲他: "キクキンウワバ、ネッタイキクキンウワバの分子系統解析と性フェロモン比較" 第41回日本応用動物昆虫学会大会講演要旨. 200- (1997)

野村正史、上原聪美、安藤聪等：《埃及伊蚊与埃及伊蚊的分子系统发育分析及性信息素比较》日本应用动物昆虫学会第41届年会摘要200-（1997年） ）