臓器横断的な多層オミクスによるタイト結合分子JAM-Aを介した癌悪性化機構の解明

様々ながん腫で異常高発現するJAM-Aと関連したがん悪性化の機序を、(1)分子レベルで、(2)臓器横断的な機序の有無を明らかにすることを目的として、本年度までに以下の実験を実施している。対象としたがん腫は、肺腺がん、子宮頸部腺がん、乳がん、膵がんである。我々のこれまでの研究成果により、肺腺がんや子宮頸部腺がんでは、外科病理検体を用いた免疫組織化学で、JAM-Aが、がんにおいて異常高発現することを確認している。加えて本年度は、乳がんと膵がんについてもJAM-Aの免疫組織化学を行い、がんにおいてJAM-Aが異常高発現することを確認した。次に、複数がん腫で確認されるJAM-Aの異常高発現が、がん細胞の悪性形質にどのような影響を及ぼすのかを解析するために、がん細胞株を用いた検討を行った。肺腺がん細胞株 (LHK2)、子宮頸部腺がん細胞株 (HCA1)、乳がん細胞株 (MCF7)において、CRISPR -Cas9システムによるJAM-Aの発現欠失やsiRNAによる発現抑制により、増殖能、遊走能、浸潤能、抗がん剤への耐性などのがん悪性化能が有意に低下した。膵がん細胞株 (HPAC)については、JAM-A発現欠損株を樹立し、現在、機能解析を行っている。MCF7では、更に、FLAG標識したJAM-Aベクターを野生型株やJAM-A発現欠損株に導入した、JAM-A過剰発現株及びJAM-A発現回復株を樹立した。JAM-Aの過剰発現により増殖能は有意に上昇し、また、JAM-A発現欠損株へのJAM-Aの発現回復で、増殖能が可逆的に回復した。JAM-Aの発現変化に伴う、タンパク発現プロファイルの変化を網羅的に明らかにするため、LHK2とHCA1は野生型株とJAM-A発現欠損株について、MCF7は野生型株、JAM-A発現欠損株、発現回復株について、プロテオーム解析のデータを取得し、現在解析を試みている。

様々ながん腫で異常高発現するJAM-Aと関連したがん悪性化の機序を、(1)分子レベルで、(2)臓器横断的な機序の有無を明らかにすることを目的として、本年度までに以下の実験を実施している。対象としたがん腫は、肺腺がん、子宮頸部腺がん、乳がん、膵がんである。我々のこれまでの研究成果により、肺腺がんや子宮頸部腺がんでは、外科病理検体を用いた免疫組織化学で、JAM-Aが、がんにおいて異常高発現することを確認している。加えて本年度は、乳がんと膵がんについてもJAM-Aの免疫組織化学を行い、がんにおいてJAM-Aが異常高発現することを確認した。次に、複数がん腫で確認されるJAM-Aの異常高発現が、がん細胞の悪性形質にどのような影響を及ぼすのかを解析するために、がん細胞株を用いた検討を行った。肺腺がん細胞株 (LHK2)、子宮頸部腺がん細胞株 (HCA1)、乳がん細胞株 (MCF7)において、CRISPR -Cas9システムによるJAM-Aの発現欠失やsiRNAによる発現抑制により、増殖能、遊走能、浸潤能、抗がん剤への耐性などのがん悪性化能が有意に低下した。膵がん細胞株 (HPAC)については、JAM-A発現欠損株を樹立し、現在、機能解析を行っている。MCF7では、更に、FLAG標識したJAM-Aベクターを野生型株やJAM-A発現欠損株に導入した、JAM-A過剰発現株及びJAM-A発現回復株を樹立した。JAM-Aの過剰発現により増殖能は有意に上昇し、また、JAM-A発現欠損株へのJAM-Aの発現回復で、増殖能が可逆的に回復した。JAM-Aの発現変化に伴う、タンパク発現プロファイルの変化を網羅的に明らかにするため、LHK2とHCA1は野生型株とJAM-A発現欠損株について、MCF7は野生型株、JAM-A発現欠損株、発現回復株について、プロテオーム解析のデータを取得し、現在解析を試みている。