膵癌進展におけるヒストン修飾蛋白SETDB1の機能的役割の解明

阐明组蛋白修饰蛋白 SETDB1 在胰腺癌进展中的功能作用

• 批准号: 22KJ2232
• 负责人: 小川 智
• 金额: $ 3.08万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2023
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2023-03-08 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22KJ2232/
• 关键词: 膵癌

本研究はヒストン修飾因子であるSETDB1が膵癌の維持・進行において果たす機能的役割を明らかにするため、Dual-recombinaseシステムによる膵癌モデルマウスを用いて膵発癌後の任意の時期にSETDB1をin vivoでノックアウトし、膵癌の維持・進行におけるSetdb1の機能的役割の解析を試みている。さらに、ヒト膵癌3次元培養システムを用いて患者の膵癌組織からオルガノイドを樹立し、これを用いてSETDB1がヒト膵癌の治療標的となりえるか検証している。上記目的を達成するために本年度は下記のように実施した。まず、作成したFlp/frtシステムで膵癌を形成し、タモキシフェン投与によりCre/loxpシステムでSetdb1をノックアウトできるPdx1-Flp; FSF-KrasG12D; Trp53 frt/+; FSF-Rosa26CreERT2; Setdb1flox/floxマウスの解析を試みた。タモキシフェンを投与して非投与群との比較を検討したが、十分な個体数に十分な量のタモキシフェンを投与してから、ある程度の期間比較し、解析することが困難であった。そのため、十分な個体数を確保して比較するためにこのマウスからオルガノイド、細胞株を樹立し、同所移植モデルを作成してからタモキシフェンを投与してSetdb1をノックアウトし、表現系を検討する方針とした。また、外科手術または超音波内視鏡下穿刺吸引法などで採取したヒト膵がん患者の膵がん組織から3次元培養システムを用いて複数の膵がんオルガノイドの樹立を行った。さらに、Crisper/Cas9システムによるSETDB1ノックアウト用のターゲットベクターを作成した。今後、樹立した複数のヒトオルガノイドを用いてこのベクターやSetdb1阻害剤を用いてSetdb1を阻害した際の表現型を評価する。

In this study, the analysis of SETDB1 function in vivo at any time after cancer development was performed by Dual-recombinase modification factors such as SETDB1 in vivo, SETDB1 in vivo. In addition, SETDB1 is used to establish the target of cancer treatment. This year's goal was achieved. Pdx1-Flp; FSF-KrasG12D; Trp53frt/+; FSF-Rosa26CreERT2; Setdb1flox/flox; and Cre/loxp; Comparison between the number of units and the number of units is difficult. The number of cells in the cell line is determined by the number of cells in the cell line, the number of cells in the cell line and the number of cells in the cell line. For surgical procedures, the method of puncture and aspiration under ultrasound endoscope can be used to establish a three-dimensional culture system for patients. Crisper/Cas9 is the most important part of SETDB1. In the future, we will establish a set of criteria for evaluating the performance of Setdb 1.

项目成果

Concurrent activation of Kras and canonical Wnt signaling induces premalignant lesions that progress to extrahepatic biliary cancer in mice

Kras 和经典 Wnt 信号传导的同时激活可诱导小鼠癌前病变进展为肝外胆管癌

• DOI: 10.1158/0008-5472.can-21-2176
• 发表时间: 2022
• 期刊: Cancer Res.
• 作者: Nagao M;Fukuda A;Omatsu M;Namikawa M;Sono M;Fukunaga Y;Masuda T;Araki O;Yoshikawa T;Ogawa S;Masuo K;Goto N;Hiramatsu Y;Muta Y;Tsuda M;Maruno T;Nakanishi Y;Taketo MM;Ferrer J;Tsuruyama T;Nakanuma Y;Taura K;Uemoto S;Seno H.
• 通讯作者: Seno H.