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網膜GABAc受容体活性の細胞内制御機構

视网膜GABAc受体活性的细胞内控制机制

基本信息

批准号：
08680893
负责人：
金田誠
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08680893/
关键词：
網膜水平細胞 GABAc受容体 Ca^<2+>

项目摘要

網膜GABAc受容体活性は、細胞外亜鉛イオンや細胞内protein kinase AまたはCで調節されるが、細胞内調節機構に関係するprotein kinaseについては動物間の種差が大きく結論が出ていない。本研究ではアメリカナマズ網膜水平細胞にホールセルクランプ法を適用し、GABAc受容体活性が細胞外Caイオンにより調節されることを見いだしたので、その詳細な機構と本機構へのprotein kinase Cの関与の有無について報告する。今回の実験では長期培養に耐えうる錐体入力を受ける培養網膜水平細胞を用いた。急速潅流法を用いてGABAを投与したときにGABAc受容体を介して発生するイオン電流は細胞外Ca濃度を上昇させると増大し、細胞外Ca濃度を低下させると減少した。このGABA応答の濃度-反応曲線をHillの式で記述するのに必要なHill係数とEC_<50>は、細胞外Ca濃度が2.5mMのとき1.54と3.0μM、10mMのとき1.24と3.1μMとなりほぼ同じであった。しかしながら10mM Ca液中で得られる最大応答は2.5mM Ca液中で得られる最大応答より大きかった。このことから細胞外Ca濃度の増大に伴うGABA応答の増大は、GABAc受容体のGABAに対する親和性の増大によるのではなく、GABAc受容体のチャネル活性を高めることによってGABA応答を増強しているものと考えられた。このGABA応答は、Caチャネルを介する細胞外からのCa流入を活性化して細胞内Ca濃度を上昇させても増強されなかった。このことからアメリカナマズにおける細胞外Ca濃度の増大に伴うGABA応答の増大は、細胞外に存在するCa結合部位における修飾機構によると結論した。また細胞外からのCa流入を活性化しても応答に変化が起こらないことからprotein kinase Cを介する細胞内機構は存在しないと考えられた。

Omentum GABAc receptor activity, extracellular receptors, intracellular protein kinase A, C regulation, intracellular regulatory mechanisms, relationship, protein Kinase is the difference between animals and the conclusion is that there is no big difference between animals. In this study, the ではアメリカナマズ omentum level cell にホールセルクランプ method was applied and the GABAc receptor activity was determined. Extracellular Ca イオンによりRegulationされることを见いだしたので、そのDetailsなMechanismとThis institutionへのprotein The status of kinase C and whether it exists or not is reported. This time, the long-term culture of omentum horizontal cells has been carried out. The rapid flow method uses GABA and casts it into the GABAc receptor. The current increases when the extracellular Ca concentration increases, and decreases when the extracellular Ca concentration decreases.このGABAￜAnswer concentration-reaction curve をHill formula で description するのにNecessary なHill coefficient とEC_<50>は, extracellular The Ca concentration is 2.5mM のとき1.54と3.0μM, 10mM のとき1.24と3.1μM and the same as じであった.しかしながらThe maximum response in 10mM Ca solution is the maximum response in 2.5mM Ca solution.このことからThe increase in extracellular Ca concentration is accompanied by the increase in GABA's response, and the GABAc receptor's affinity is increased.よるのではなく、GABAc receptor activity を高めることによってGABA応 Answer を Increase the strength しているものと卡えられた.このGABA応 Answer は、Ca チャネルを Introduction するExtracellular からのCa influx Activation してIntracellular Ca concentration をRise させても Increase Strength されなかった.このことからアメリカナマズにおける Increase the extracellular Ca concentration and increase the GABA response The conclusion is that the Ca binding site exists outside the cell and the modification mechanism is large.またExtracellular からのCa influx をActivation しても応respond に変化が开こらないことからprotein kinase C is the existence of the intracellular mechanism and the test of the existence of the intracellular mechanism.