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革新的機能的ヒト抗体配列ーエピトープのハイスループット解析技術開発

创新功能性人源抗体序列——高通量表位分析技术开发

基本信息

批准号：
22K18919
负责人：
中野秀雄
金额：
$ 4.16万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-06-30 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

標的分子に結合するモノクローナル抗体を網羅的に取得することと、取得抗体のエピトープを決定することは、免疫系を理解し、それらを医療だけでなく様々に産業利用していくためには大変重要な技術課題である。ともに一つの抗体に対して作業を行う場合でも数ヶ月単位の時間が要する作業であり、相当のコストがかかる。したがって生体内に存在する10の16から18乗にものぼるレパートリーのうち、ある特定の抗原に対するほんの少しもの抗体とそのエピトープを「網羅的」に解析することは全く不可能であった。本研究では、抗体配列とそのエピトープ、網羅的に解析することを可能にする技術課題に取り組んでいる。本年度は、第一段階として1)リボソームディスプレイを用いたウサギおよびヒトFab抗体のライブラリー構築技術の開発とモデルスクリーニングの実施2)リボソームディスプレイ、次世代シーケンス、とバイオインフォマティクスによるエピトープ推定技術の開発に取り組んだ。1)については、ヒト・ウサギの抗体を網羅的にリボソーム上に提示できるプライマー設計とそのモデルスクリーニングを行った。腸内細菌を抗原としてそれに結合できるヒト抗体配列を、リボソームディスプレイにより濃縮した。２）については、ランダムペプチドライブラリーをリボソーム上に提示し、モデルとした抗タグ抗体に結合するペプチド配列を濃縮し、次世代シーケンス解析と独自に作成したPythonプログラムを用い、標的分子中からエピトープを推定する手法を開発した。

The target molecule binds to the antibody network and determines whether the antibody is available for industrial use. For example, if you want to do a job, you need to do it for a few months. 10 of 18 are present in the organism, and the specific antigen is present in the organism. This study is aimed at the analysis of antibody alignment and its possible technical problems. This year, the first stage is: 1) Development and implementation of the technology for the construction of Fab antibodies in the first generation; 2) Development and implementation of the technology for the construction of Fab antibodies in the second generation. 1) The tips on the design and selection of the antibody network are displayed on the screen. Intestinal bacteria antigen binding, antibody alignment, and concentration 2) The selection, classification, and selection of anti-antibody combinations are concentrated, and the next generation of anti-antibody analysis is independently created. The method of estimating the selection of target molecules is developed.