ムチン21による糖鎖構造依存的アポトーシス抑制機構の解明

阐明粘蛋白 21 糖链结构依赖性细胞凋亡抑制机制

• 批准号: 13J10986
• 负责人: 田 園
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2013
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2013 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13J10986/
• 关键词: ムチン; がん; 糖鎖; アポトーシス; MUC21

ヒトムチン21 (MUC21)は、当研究室において同定された膜貫通型ムチンである。これまですでにMUC21がアポトーシスを制御することが示された。しかし、MUC21がアポトーシスを抑制するメカニズムは不明であった。本研究では、MUC21のどの部位がアポトーシス抑制に関与するか、また、MUC21糖鎖構造とアポトーシス抑制の関与について検討した。タンデムリピートを欠損させたMUC21 (Δ-TR)、及び細胞内ドメインを欠損させたMUC21 (Δ-CT)をHEK293細胞に強制発現させ、アポトーシス抑制における役割を検討した。これらの強制発現細胞に対してEtoposide処理によりアポトーシスを誘導したところ、全長MUC21強制発現細胞に見られていたアポトーシス抵抗性はΔ-TR及びΔ-CT細胞では観察されず、タンデムリピート及び細胞内ドメインの双方がMUC21のアポトーシス抑制機能に必須であることが示された。次に、MUC21の糖鎖構造の違いがアポトーシス抑制に与える影響を検討するため、CHO-K1細胞及びその糖鎖合成不全細胞株であるCHO-ldID細胞、CHO-Lec2細胞のMUC21強制発現細胞をEtoposideで処理した。CHO-K1細胞はHEK293細胞と同様に、MUC21発現細胞ではmock細胞に比べてアポトーシスが抑制された。また、T抗原が付加したLec2細胞においても、MUC21強制発現細胞がmock細胞と比べてアポトーシス抵抗性を示した。一方で、O型糖鎖を合成できないldlD細胞ではMUC21強制発現細胞とmock細胞とではアポトーシスに差は見られなかった。さらに、Tn抗原を付加させたldlD細胞ではMUC21発現細胞とmock細胞とではアポトーシス抵抗性に差は見られなかったがシアリルT抗原を付加させた細胞では、MUC21発現細胞がmock細胞に比べてアポトーシスに抵抗性を持つようになった。これらの結果から、MUC21に付加する伸長した糖鎖が細胞のアポトーシス抵抗性に重要な役割を果たしていることが示唆された。今後はこの研究を発展させることによって、特定の糖鎖構造を持つMUC21をがん治療の新しいターゲットとして利用することも可能であり、がん治療に大きく貢献することができると期待される。

ヒトムチン21 (MUC21) is the same as the laboratory において and the されたmembrane through-type ムチンである.これまですでにMUC21 がアポトーシスをcontrol することが出された.しかし, MUC21 がアポトーシスを suppresses するメカニズムは unknown であった. In this study, MUC21's のどのpart of MUC21's がアポトーシス inhibits に关 and するか,また, MUC21 sugar lock structure and とアポトーシス inhibit the relationship between the について検検検検した.タンデムリピートを无码させたMUC21 (Δ-TR), and intracellular ドメインを无码させたMUC21 (Δ-CT) HEK293 cells are forced to develop and suppressed.これらのforced 発 appear cells に対してEtoposide treatment によりアポトーシスをinducing Guidance, full-length MUC21 forced appearance cell resistanceはΔ-TR and びΔ-CT cell では禳看されず, タンデムリピート and び intracellular ドメThe function of the MUC21 MUC21 suppressor must be suppressed. The sugar lock structure of MUC21 is inhibited and the glycol lock structure of MUC21 is inhibited and the glycol lock structure is not synthesized in CHO-K1 cells and sugar locks. The whole cell line is CHO-ldID cells, CHO-Lec2 cells, and MUC21 forced cells are Etoposide-treated. CHO-K1 cells are the same as HEK293 cells, and MUC21 cells are the same as mock cells.また、T antigen がFUKA したLec2 cells においても、MUC21 forced appearance cells がmock cells と比べてアポトーシスresistant をshow した. One side, O-type sugar lock を synthetic できないldlD cell ではMUC21 forced 発appearance cell とではアポトーシスに difference られなかった.さらに, Tn antigen を pay plus させたldlD cells ではMUC21発appearance cells とではアポトーシス resistance にdifferent は见られなかったがシアリルT antigen をAdded させたcell では、MUC21発appearance cell がMock cell に べ て ア ポ ト ー シ ス に resistant を holder つ よ う に な っ た.これらのRESULTから、MUC21にFUKAするStretchしたsugar lockがcellのアIt's important to resist resistance. Future research and development, specific sugar lock structure maintenance, MUC21 treatment, new developmentーゲットとして utilizes することもpossible であり, がんtreatment に大きく contributes することができるとlooks forward to される.