植物マイナス鎖RNAウイルスのリバースジェネティクス系確立に向けた分子基盤の構築

植物负链RNA病毒反向遗传学体系的分子基础构建

基本信息

  • 批准号:
    13J07458
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.3万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
  • 财政年份:
    2013
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2013-04-01 至 2016-03-31
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

研究目的はマイナス鎖RNAウイルスであるfig mosaic virus (FMV)の感染性クローン作成の基盤の構築であり、研究計画では本年度には、FMVの感染性クローンの作出を完了し、植物体内と媒介虫体内におけるウイルスの挙動を調べる予定であった。しかし、ウイルス複製酵素を発現させることができず、感染性クローンは作成することが出来なかった。動物マイナス鎖RNAウイルスにおける例では、ウイルスのゲノムRNAと同時にウイルス複製酵素やヌクレオキャプシドプロテインを同時に発現させることで、感染性クローンの作成を行っており、複製酵素はウイルスの複製に必須な因子であると考えられる。本年度開始までに、FMVゲノムRNAとヌクレオキャプシドプロテインの発現系の構築を完了しており、ウイルス複製酵素については植物体内で発現するベクターへのクローニングは完了していたものの、植物体内における発現が認められていなかった。そこで代替の手段として無細胞翻訳系で様々な条件で発現を試みたが、いずれも複製酵素の全長を発現させることは出来なかった。マイナス鎖RNAウイルスの遺伝子の発現は、複製とカップリングしているという報告が有る。複製酵素遺伝子が座上するゲノムセグメントを複製することができれば、翻訳が同時に起こる可能性があると考え、複製感染細胞より複製活性のある画分を回収することを試みたが、ウイルスゲノムの複製を再現することはできなかった。
Research purposeはマイナスLOCK RNAウイルスであるfig mosaic virus (FMV)'s infectiousness is the basis for the creation of the basic structure, the research plan is this year's research, and the infectiousness of FMVクローンの成をFINISHEDし, におけるウイルスの挙猙动を Adjustment べる簧あった in the body of the plant and in the vector insect.しかし, ウイルスReplication enzyme を発appears させることができず, infectious クローンは 成することが出なかった. Animal マイナスRNA ウイルスにおける Example では、ウイルスのゲノムRNA and simultaneous replication enzyme やヌクレオキャプシドプロテインを Simultaneous に発 appear させることで, infectious クローンの成を行っておはウイルスのReplication enzyme is a necessary factor for replication. Starting this year, FMV ゲノムRNA とヌクレオキャプシドThe construction of the プロテインの発 is now complete, the ウイルス replication enzyme is completed The plant inside the plant is finishedていたものの, における発 appear in the plant body and recognize められていなかった. The method of replacement is the method of cell-free translation and the conditions are now testedたが、いずれもReplication enzymeのfull lengthを発appearsさせることは出なかった.マイナスRNAウイルスの缝子の発appearsは、Copyとカップリングしているというreportが有る. Replication Enzyme Replication Enzyme Replication Enzyme Infected cells can be reproduced by controlling the replication activity of infected cells and reproducing them.

项目成果

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专利数量(0)
東京大学大学院農学生命科学研究科植物病理学研究室ホームページ
东京大学研究生院农学生命科学研究科植物病理学实验室主页
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
fig mosaic virus の nucleocapsid protein の形成する細胞質凝集体は小胞体流動 により受動的に運搬される
由花叶病毒核衣壳蛋白形成的细胞质聚集体通过内质网流被动运输。
  • DOI:
  • 发表时间:
    2015
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Ishikawa K.;Miura C.;Maejima K.;Komatsu K.;Hashimoto M.;Tomomitsu T.;Fukuoka M.;Yusa A.;Yamaji Y.;Namba S.;吉田哲也・石川一也・三浦千裕・笹野百花・前島健作・小松健・山次康幸・難波成任;石川一也・三浦千裕・吉田哲也・前島健作・小松健・山次康幸・難波成任
  • 通讯作者:
    石川一也・三浦千裕・吉田哲也・前島健作・小松健・山次康幸・難波成任
Rapid detection of fig mosaic virus using reverse transcription loop-mediated isothermal amplification
  • DOI:
    10.1007/s10327-015-0603-1
  • 发表时间:
    2015-09-01
  • 期刊:
  • 影响因子:
    1.2
  • 作者:
    Ishikawa, Kazuya;Maejima, Kensaku;Namba, Shigetou
  • 通讯作者:
    Namba, Shigetou
fig mosaic virusのnucleocapsid proteinの細胞内局在と動態の解析
无花果花叶病毒核衣壳蛋白的胞内定位和动态分析
  • DOI:
  • 发表时间:
    2015
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Ishikawa K.;Miura C.;Maejima K.;Komatsu K.;Hashimoto M.;Tomomitsu T.;Fukuoka M.;Yusa A.;Yamaji Y.;Namba S.;吉田哲也・石川一也・三浦千裕・笹野百花・前島健作・小松健・山次康幸・難波成任
  • 通讯作者:
    吉田哲也・石川一也・三浦千裕・笹野百花・前島健作・小松健・山次康幸・難波成任
RT-LAMP法によるfig mosaic virus の簡易・迅速・高感度な検出系の開発
利用 RT-LAMP 方法开发简单、快速、高灵敏度的无花果花叶病毒检测系统
  • DOI:
  • 发表时间:
    2015
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Ishikawa K.;Miura C.;Maejima K.;Komatsu K.;Hashimoto M.;Tomomitsu T.;Fukuoka M.;Yusa A.;Yamaji Y.;Namba S.;吉田哲也・石川一也・三浦千裕・笹野百花・前島健作・小松健・山次康幸・難波成任;石川一也・三浦千裕・吉田哲也・前島健作・小松健・山次康幸・難波成任;宮﨑彰雄・石川一也・遊佐礼・友光達哉・根津修・前島健作・難波成任
  • 通讯作者:
    宮﨑彰雄・石川一也・遊佐礼・友光達哉・根津修・前島健作・難波成任
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  • 通讯作者:
    Erina Kuranaga
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车前子花叶病毒TGBp1抑制植物内源小RNA“tasiRNA”的产生途径
  • DOI:
  • 发表时间:
    2015
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Kaneko K;Tabuchi M;Sueyoshi N;Ishida A;Utsumi T;Kameshita I;石川 一也;白石 拓也;小松 健;橋本将典・遊佐礼・友光達哉・桂馬拓也・岡野夕香里・小松健・山次康幸・難波成任;二條貴通・岡野夕香里・煉谷裕太朗・橋本将典・遊佐礼・桂馬拓也・大島研郎・小松健・山次康幸・難波成任
  • 通讯作者:
    二條貴通・岡野夕香里・煉谷裕太朗・橋本将典・遊佐礼・桂馬拓也・大島研郎・小松健・山次康幸・難波成任
Construction of an infectious cDNA clone of radish mosaic virus, a crucifer-infecting comovirus.
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  • DOI:
    10.1007/s00705-013-1635-5
  • 发表时间:
    2013
  • 期刊:
  • 影响因子:
    2.7
  • 作者:
    Kaneko K;Tabuchi M;Sueyoshi N;Ishida A;Utsumi T;Kameshita I;石川 一也;白石 拓也;小松 健
  • 通讯作者:
    小松 健
ダイコンモザイクウイルスの感染による茎頂壊死の誘導因子
萝卜花叶病毒感染引起的茎尖坏死诱导剂
  • DOI:
  • 发表时间:
    2015
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Kaneko K;Tabuchi M;Sueyoshi N;Ishida A;Utsumi T;Kameshita I;石川 一也;白石 拓也;小松 健;橋本将典・遊佐礼・友光達哉・桂馬拓也・岡野夕香里・小松健・山次康幸・難波成任
  • 通讯作者:
    橋本将典・遊佐礼・友光達哉・桂馬拓也・岡野夕香里・小松健・山次康幸・難波成任
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  • DOI:
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  • 发表时间:
    2013
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Kaneko K;Tabuchi M;Sueyoshi N;Ishida A;Utsumi T;Kameshita I;石川 一也;白石 拓也
  • 通讯作者:
    白石 拓也

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知道了