レトロウイルスにおける受容体非依存性感染と病原性発現機構の解明

阐明逆转录病毒中不依赖受体的感染和致病性表达机制

基本信息

批准号：
13J04708
负责人：
坂口翔一
金额：
$ 2.3万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2013
资助国家：
日本
起止时间：
2013-04-01 至 2016-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、感染補助因子による受容体非依存性感染に着目し、その機構の解析を試みた。本年度は、ネコ科動物におけるFeLIXの検出と解析を行い、イエネコをはじめ、ライオンなどの大型ネコ科動物、さらに大変貴重なヤマネコの血液を得ることができた。今後、野外におけるFeLV-Tの検出やFeLIX遺伝子の検出および機能解析の成果に期待される。また、本研究で分離されたネコモルビリウイルス（FmoPV）の受容体は明らかになっておらず、その宿主域も不明である。そこで、様々な動物種・組織に由来する培養細胞を用い、宿主域の解析を行った。その結果、FmoPVはネコとアフリカミドリザル由来の培養細胞のみで増殖した。ネコ由来の培養細胞では、様々な組織由来の細胞で増殖し、他のモルビリウイルスで既知の受容体とは異なる分子を用いて感染することが示唆された。さらに、FmoPVの受容体解析を行うため、ミニゲノム系の作出を行った。その結果、作出したミニゲノム系において、リーダーとトレーラー領域および転写開始と終結シグナルが動作することや、N、P、L蛋白質の供給が必要なことがわかった。さらに、C蛋白質がミニゲノム系を抑制制御している可能性が示唆された。また、この受容体の体内分布を調べるため、ネコを用いたFmoPV感染実験系の作出を行った。加えて、不活化ワクチンの有効性試験も行った。その結果、FmoPVの接種により中和抗体が誘導された。これより、感染は成立し、正常な免疫応答が起こっていると考えられた。経鼻・経口接種での感染が成立したことより、ネコ同士の接触や汚染された環境を介してFmoPVの伝播が起こることが裏付けられた。本年度の成果により、受容体非依存性感染機構について新たな知見が得られた。今後、これらの結果より、受容体非依存性感染機構を用いたウイルスに対する感染防御に役立つことが期待される。

在这项研究中，我们专注于由辅助因子引起的独立感染，并试图分析其机制。今年，我们在猫科动物中检测到并分析了菲利克斯，并能够从大猫（例如家猫，狮子和其他稀有野生动物）那里获取血液。可以预期，FELV-T在田间的检测结果，Felix基因的检测以及将来将实现功能分析。此外，这项研究中分离出的CAT Morbilivirus（FMOPV）的受体尚不清楚，并且其宿主范围也未知。因此，使用源自各种动物物种和组织的培养细胞分析宿主区域。结果，FMOPV仅在源自猫和非洲绿猴的培养细胞中生长。据建议，来自猫的培养细胞在各种组织中生长在细胞中，并用与其他病毒中已知的分子感染分子。此外，为了分析FMOPV的受体，创建了一个小型系统。结果，发现领导者和拖车区域，转录启动和终止信号是在创建的微型原理系统中运行的，并且需要N，P和L蛋白的供应。此外，有人提出C蛋白可能抑制了微型原理系统。此外，为了研究该受体的内部分布，我们使用猫创建了FMOPV感染的实验系统。另外，进行了灭活疫苗的功效测试。结果，通过接种FMOPV诱导中和抗体。这表明已经建立了感染，并发生了正常的免疫反应。鼻内和口服接种导致FMOPV通过CAT接触和受污染的环境扩散。今年的结果提供了对独立于受体的感染机制的新见解。从这些结果中可以预期，它将使用独立于受体的感染机制来保护感染免受病毒的影响。