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膜局在ユビキチンプロテアソーム系による植物の細胞間協調的な器官形成

膜定位泛素蛋白酶体系统在植物细胞中协同器官形成

基本信息

批准号：
13J05776
负责人：
水谷未耶
金额：
$ 1.92万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2013
资助国家：
日本
起止时间：
2013-04-01 至 2016-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

植物の細胞間隙は呼吸や光合成におけるガス交換に重要な組織構造であるが、その発生分子機構はほとんど分かっていない。ゼニゴケは、葉状体の背面に細胞間隙を持つ器官である気室を形成する。ゼニゴケは、葉状体の背面に細胞間隙を持つ器官である気室を形成する。我々は、植物における細胞間隙形成のモデル系として、ゼニゴケの気室形成過程を解析している。これまでに気室が形成されないゼニゴケ変異体nopperabo1 (nop1) を単離し、nop1では気室発生初期段階における細胞間隙形成が起こらないことを明らかにしている。本課題でNOP1によるタンパク質分解の標的となる因子や関連因子の単離同定を目指した。前年度までにNOP1にエピトープタグ (Citrine) を付加し，免疫沈降およびMS解析を行った。精製したNOP1-標的タンパク質複合体についてLC-MS/MS解析を行った。その結果いくつかの標的候補因子が単離されたほか、細胞壁再構築に関わる因子が高頻度で検出された。今年度はゼニゴケの遺伝子リストに細胞内局在やシロイヌナズナのアノテーション、GOターム参考にしたデータベースを作成し、候補因子を30にまで絞り込んだ。候補因子について、当研究室で確立されたゼニゴケのCRISPR/Cas9ゲノム編集システムを用いて野生型背景及びnop1背景のそれぞれで機能欠損株を取得し、気室の表現型に異常があるかどうか観察した。機能欠損株の作出は現在も進行中であるが、得られたいくつかの候補因子については気室形成に異常を示すものがあった。この因子は気室形成においてNOP1と協調して働く可能性が示唆された。これまでの研究からNOP1は細胞壁を再構築し、細胞間接着の剥離を制御していると考えられる。今後、標的候補因子や細胞壁再構築因子の詳細な解析を行うことで、細胞間隙形成の分子機構が明らかになると考えられる。

The intercellular space of plants is important for respiration and photosynthesis. The cell space on the back of the thallus is formed into a cell. The cell space on the back of the thallus is formed into a cell. The process of cell gap formation in plants is analyzed. In the early stages of cell development, cell gap formation begins in nopperabo1 (nop1). The objective of this study is to determine the correlation factors and the quality of NOP1. In the previous year, NOP1 was added to the Citrine, and the MS analysis was performed. LC-MS/MS analysis of refined NOP1-labeled complexes As a result, candidate factors for cell wall remodeling are frequently detected. This year, the cell's internal structure is in the process of creating a candidate factor of 30. Candidate factors were identified when CRISPR/Cas9 was used in the compilation of wild-type background and nop1 background, and functional impairments were obtained when phenotype abnormalities were detected in the laboratory. The function is deficient, and the production is in progress. The factors that cause the formation of NOP1 are coordinated with the probability of formation. This study included the reconstruction of NOP1 cell wall and the control of intercellular separation. In the future, target candidate factors and cell wall remodeling factors will be analyzed in detail, and the molecular mechanism of cell gap formation will be examined.

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

creen for regulatory proteins of schizogenous intercellular space formation in Marchantia polymorpha by using mass spectrometry and the CRISPR/Cas9 genome editing technology.

利用质谱和 CRISPR/Cas9 基因组编辑技术，建立了地钱裂殖细胞间隙形成调节蛋白的筛选。

DOI：
发表时间：
2016
期刊：
影响因子：
0
作者：
Miya Mizutani;Kimitsune Ishizaki;Yoichiro Fukao;Masayuki Fujiwara;Akihide Masuda;Ryuichi Nishihama;Takayuki Kohchi
通讯作者：
Takayuki Kohchi

ゼニゴケPUB型E3ユビキチンリガーゼNOPPERABO1は気室発生における離生細胞剣劇形成を正に制御する

地钱PUB型E3泛素连接酶NOPPERABO1在气室发育过程中正向调节附生细胞的形成