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ワニの温度依存的性決定における性分化関連遺伝子の発現制御と温度受容のメカニズム

鳄鱼性别分化相关基因表达调控及温觉性别决定机制

基本信息

批准号：
13J02329
负责人：
岡香織
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2013
资助国家：
日本
起止时间：
2013-04-01 至 2015-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

温度依存的性決定ではホルモンシグナルが重要な働きを担っている。本年度は①温度依存的性決定の爬虫類の内分泌系の理解、②ホルモンシグナルによる性決定・性分化関連遺伝子の調節機構の解明を目的として研究を行った。①アリル炭化水素受容体（AHR）の機能解析アメリカアリゲーターから得ていた配列の一つがC末端の短くなった変異配列であることが判明した。全長配列を単離し再度解析した結果、全長配列は変異配列とリガンド感受性は変わらない一方、転写活性が上昇した。C末端側の配列は受容体間で保存性が低いが、転写活性化ドメインの機能は維持していることが示唆された。ワニの3種類のAHRはそれぞれ異なる転写活性化能を有し、1種類しかAHRを持たない哺乳類と比較して、より複雑な制御機構を持つと考えられる。②糖質コルチコイドシグナルと性分化の関与ストレス応答に関わるホルモン・糖質コルチコイドの受容体（GR）がSOX9依存的な抗ミュラー管ホルモン（AMH）遺伝子の発現を抑制するという結果を得ていた。昨年度同定したGRの結合候補領域（約50bp）を欠く配列でレポーターアッセイを行ったが、転写抑制の度合は変わらなかった。この領域周辺の配列は、直接的な結合ではなく、結合の安定化や抑制性複合体の形成に寄与している可能性がある。また、異なる細胞株を用いた場合、GRはAMHの転写活性の促進に働いた。この転写活性化はGRのDNA結合能を必要とせず、転写抑制とは異なる機構で生じていた。糖質コルチコイドシグナルは細胞の状態依存的に性分化関連遺伝子の発現を双方向に制御することが考えられた。生体内での糖質コルチコイドシグナルの関与を検証するため、ミシシッピアカミミガメの胚への曝露実験を試みた。しかし本年度は、コルチコステロン曝露群・メチラポン曝露群ともに顕著な影響は見られなかった。今後条件検討、in vitro実験系との比較を行う必要がある。

Temperature dependence determines whether the temperature is important. This year, we conducted research on (1) understanding of the endocrine system of reptiles in relation to temperature-dependent sex determination, and (2) elucidating the regulatory mechanisms of sex determination and sex differentiation. 1. Functional analysis of carbon hydrocarbon receptor (AHR). The results of the analysis of the full-length alignment are as follows: the full-length alignment is different from the hetero-alignment; the sensitivity is different from that of the full-length alignment; and the writing activity is increased. C terminal side of the array between the receptors is low preservation, write activation of the function is maintained 3 kinds of AHR are different from each other in terms of activation energy, 1 kind of AHR is different from each other in terms of mammals, and 2 kinds of AHR is different from each other in terms of control mechanism.② The relationship between sugar and sexual differentiation is related to the response of sugar. The receptor (GR) of sugar can inhibit the occurrence of SOX9-dependent anti-inflammatory hormone (AMH) genes. In the same year, GR was combined with candidate fields (about 50bp). The possibility of direct binding, stabilization of binding, and formation of inhibitory complexes is discussed. In the case of different cell strains, GR promotes the activity of AMH. The DNA binding activity of GR is necessary, and the DNA binding activity is inhibited. Glycoprotein expression is related to the development of cell state-dependent genes, which are controlled in both directions. The relationship between glucose and glucose in vivo was investigated. This year's report shows that the impact of exposure to greenhouse gases has increased. In the future, we will discuss the conditions and compare them with each other.