クロマチン構造上における減数分裂期組換えの分子機構
减数分裂重组对染色质结构的分子机制
基本信息
- 批准号:13J03652
- 负责人:
- 金额:$ 2.05万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for JSPS Fellows
- 财政年份:2013
- 资助国家:日本
- 起止时间:2013-04-01 至 2016-03-31
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
本研究は、相同組換え酵素RAD51およびDMC1の機能差異を明らかにし、減数分裂期組換えの分子機構を明らかにすることを目的とする。本年度はクロマチン構造上におけるRAD51とDMC1の機能差異に着目し、研究を行った。これまでに申請者は、DMC1-単鎖DNA複合体のヌクレオソームに対する結合性は、RAD51と比較して著しく低いことを見出している。本年度では、ヌクレオソームがDMC1-単鎖DNA複合体の結合を阻害する理由を明らかにすることを試みた。そこで、ヌクレオソームを構成するヒストンのN末端(ヒストンテール)に着目し、H2A、H2B、H3、H4のそれぞれのヒストンテールを欠損させたヌクレオソームを試験管内で再構成した。再構成したヌクレオソームを用いて、ヒストンテールがRAD51-単鎖DNA複合体およびDMC1-単鎖DNA複合体のヌクレオソームに対する結合性に与える影響を解析した。その結果、ヒストンテールはDMC1-単鎖DNA複合体のヌクレオソームに対する結合を阻害することを明らかした。本年度は新たな研究展開として、減数分裂期組換えにおけるシナプトネマ複合体の機能に着目し、研究を開始した。シナプトネマ複合体は、減数分裂期特異的な染色体構造であり、減数分裂期組換えの進行に必須である。シナプトネマ複合体構成因子の中でも、lateral elementを構成するSYCP3は減数分裂期組換えにおいて重要な役割を果たすことが、マウスを用いた解析から明らかになっている。そこで、SYCP3をリコンビナントタンパク質として精製し、SYCP3がRAD51とDMC1の相同的対合反応に与える影響を解析した。その結果、SYCP3はRAD51依存的な相同的対合反応を阻害するのに対し、DMC1依存的な相同的対合反応には影響を与えないことがわかった。現在、これらの分子機構の解明に向けた解析を行っている。
The purpose of this study is to clarify the functional differences between RAD51 and DMC1 in the same group and to clarify the molecular mechanisms of meiotic transformation. This year, we will focus on the structural differences between RAD51 and DMC1. The applicants were asked to examine the binding properties of the DMC1-linked DNA complex and compare it to RAD51. This year, the reasons for the inhibition of DMC1-DNA complex binding were clarified. The N-terminal (N-terminal) of the system is composed of H2A, H2B, H3 and H4. The system is composed of N-terminal and N-terminal components. Analysis of the binding properties of RAD51-single DNA complex and DMC1-single DNA complex As a result, the DNA binding resistance of DMC1-DNA complex was significantly reduced. This year, new research on meiotic organization and function of meiotic complex was started. Chromosome structure specific to meiosis, meiosis group transition necessary to proceed. SYCP3 is composed of the middle and lateral elements of the meiotic complex. SYCP3, RAD51, DMC1, and the like are combined and analyzed. SYCP3 is dependent on RAD51 for the same coupling effect, DMC1 is dependent on the same coupling effect. Now, the molecular structure of the molecular structure of the solution to the analysis of the process.
项目成果
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专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Nap1 stimulates homologous recombination by RAD51 and RAD54 in higher-ordered chromatin containing histone H1.
- DOI:10.1038/srep04863
- 发表时间:2014-05-06
- 期刊:
- 影响因子:4.6
- 作者:Machida S;Takaku M;Ikura M;Sun J;Suzuki H;Kobayashi W;Kinomura A;Osakabe A;Tachiwana H;Horikoshi Y;Fukuto A;Matsuda R;Ura K;Tashiro S;Ikura T;Kurumizaka H
- 通讯作者:Kurumizaka H
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- DOI:10.1266/ggs.89.169
- 发表时间:2014-08-01
- 期刊:
- 影响因子:1.1
- 作者:Kobayashi, Wataru;Sekine, Satoshi;Kurumizaka, Hitoshi
- 通讯作者:Kurumizaka, Hitoshi
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