急性骨髄性白血病におけるＤＮＭＴ３Ａ変異の機能解析

急性髓系白血病DNMT3A突变的功能分析

• 批准号: 13J00996
• 负责人: 古屋 淳史
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2013
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2013-04-01 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13J00996/
• 关键词: 急性骨髄性白血病; DNMT3A

1. DNMT3A変異の標的遺伝子の造血幹細胞分画増幅における役割の検証平成25年度にDNMT3Aがポリコーム抑制複合体1 (PRC1)と結合すること、および変異によりその結合能が亢進することを見出していたため、その造血幹細胞分画増幅における機能的意義を検証した。PRC1の構成因子であるBmi1のヘテロノックアウトによって、変異型DNMT3Aによる造血幹細胞分画の割合を増加させる効果が打ち消され、さらにBmi1のヘテロノックアウトにより変異型DNMT3Aを導入することで低下していたPU.1の発現が正常レベルまで上昇することが明らかとなった。2. 生理的レベルにおけるDNMT3AとPRC1複合体との協調関係の解析DNMT3A変異を有しているAML細胞株(OCI-AML3)および有していないAML細胞株(THP1)を用いて、PRC1複合体の構成因子の一つであるRING1Bのノックダウンを行い、DNMT3A変異の有無におけるPRC1複合体の機能的意義を検証した。すると、RING1BのノックダウンはTHP1では増殖に影響を与えなかった一方で、OCI-AML3では分化傾向を伴った増殖の抑制を認め、生理的レベルの発現においても変異型DNMT3AとPRC1複合体との協調関係がAML細胞の維持に重要な役割を果たしていることが明らかとなった。3. DNMT3A変異を有する白血病モデルの構築変異型DNMT3AとHOXA9をマウス骨髄細胞に導入すると、in vitroにおいて単芽球に形質転換することを見出した。さらに、Bmi1のヘテロノックアウトによりこのマウス骨髄細胞の単芽球への形質転換能は打ち消され、2と合わせて造血幹細胞のみならず白血病細胞においても、変異型DNMT3AとPRC1の協調関係が分化の抑制に寄与していることが明らかとなった。

1. In 2015, the functional significance of the increase in the composition of hematopoietic stem cells due to the change in DNMT3A's target gene was demonstrated by the increase in the binding energy of DNMT3A to the polyclonal inhibitory complex 1 (PRC1) and the increase in the binding energy of DNMT3A. The component factor of PRC1, Bmi1, is the target of the gene expression of the hematopoietic stem cell, and the expression of the variant DNMT3A is the target of the gene expression of the hematopoietic stem cell. 2. Analysis of the coordination relationship between DNMT3A and PRC1 complex and its physiological characteristics; identification of the functional significance of DNMT3A and PRC1 complex in AML cell line (OCI-AML3) and AML cell line (THP1). In addition, Ring1B has been found to be involved in the inhibition of proliferation of THP1 cells. In addition, OCI-AML3 has been found to be involved in the inhibition of proliferation of THP1 cells. In addition, it has been found that the coordination of DNMT3A and PRC1 complexes is important for AML cell maintenance. 3. DNMT 3A and HOXA9 are introduced into leukemia cells and expressed in vitro. In addition, Bmi1 and Bmi1 are involved in the regulation of differentiation and inhibition of differentiation in hematopoietic stem cells.

项目成果

Leukemia-associated mutations of DNMT3A inhibit differentiation of hematopoietic stem and leukemic cells via aberrant recruitment of polycomb repressive complex 1

白血病相关的 DNMT3A 突变通过异常招募多梳抑制复合物 1 抑制造血干细胞和白血病细胞的分化

• 发表时间: 2014
• 作者: Junji Koya;Keisuke Kataoka;Takako Kishino-Tsuruta;Hiroshi Kobayashi;Kensuke Narukawa;Tomohiko Sato;and Mineo Kurokawa.
• 通讯作者: and Mineo Kurokawa.

Leukemia-assaciated mutations of DNMT3A inhibit differentiation of hematopoietic stem cells and promote leukemic transformation through aberrant recruitment of Bmil

白血病相关的 DNMT3A 突变抑制造血干细胞的分化，并通过 Bmil 的异常募集促进白血病转化

• 发表时间: 2013
• 作者: Junji Koya;Keisuke Kataoka;Takako Kishino-Tsuruta;Hiroshi Kobayashi;Kensuke Narukawa;Tomohiko Sato;and Mineo Kurokawa.
• 通讯作者: and Mineo Kurokawa.

Functional role of DNMT3A mutation in AML

DNMT3A 突变在 AML 中的功能作用

• 发表时间: 2013
• 作者: Junji Koya;Keisuke Kataoka;Takako Tsuruta-Kishino;Hiroshi Kobayashi;Kensuke Narukawa;Tomohiko Sato;and Mineo Kurokawa.
• 通讯作者: and Mineo Kurokawa.