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Ｈｉｐｐｏシグナル経路による細胞間コミュニケーションの解析

通过 Hippo 信号通路分析细胞间通讯

基本信息

批准号：
13J01059
负责人：
加村啓一郎
金额：
$ 1.62万
依托单位：
Kumamoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2013
资助国家：
日本
起止时间：
2013-04-01 至 2015-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13J01059/
关键词：
Hippoシグナル細胞間コミュニケーション発生

项目摘要

今年度は、前年度に引き続き、モザイク胚において、細胞競合が生じるメカニズムを明らかにすること、に取り組んできた。具体的には、薬剤（タモキシフェン）誘導型のCre/loxPシステムを利用し、導入遺伝子の発現細胞をモザイク状にもつ胚（モザイク胚）を作製した。導入遺伝子として、Rosa26遺伝子座から、Tead活性化型もしくはTead不活性化型をGFPと共に発現誘導し、さらに、正常細胞の指標とするため、同じ遺伝子座から核移行型mCherryを発現誘導した。実際には、これらのマウス胚（E7.5）を培養下で薬剤誘導して、モザイク胚を作製し、共焦点顕微鏡を用いて２４時間程度のタイムラプス・ライブイメージングをおこなった。その結果、Tead 活性化型、不活性化型共に、Tg細胞が出現するタイミングが、正常細胞に比べて遅く、誘導直後からTg細胞が排除されていることが予想された。そこで、誘導直後の胚をより詳細に観察していくと、細胞が断片化されて、組織内に取り込まれていくような現象が複数観察された。また、遅いながらも出現してきたTg細胞が、その後どのような運命をたどるのか（排除されるのか否か）を確認するために、誘導4日後の胚（E6.5で薬剤投与し、E10.5で固定）でもTg細胞と正常細胞の割合を観察した。現在のところ予備的な結果ではあるが、Tg細胞の存在がある程度認められており、必ずしも全てのTg細胞が排除されるわけではないことが確認できた。このことから、研究計画で提案してきた、異質なものもある程度は許容する「細胞協調」の仕組みが備わっていることが示唆された。

This year, the previous year, the introduction of "," The specific Cre/loxP system is used to control the development of cells in which the gene is introduced. The expression of GFP, Tea26, Tea26, Tea26, In the meantime, under the condition of culture, the enzyme is induced, the enzyme is controlled, and the confocal microscope is used for 24 hours. The results showed that Tead activation type, inactivation type and Tg cells were present in the normal cells, compared with the normal cells, and Tg cells were excluded. After induction, the embryo is observed in detail, the cell is fragmented, and the tissue is extracted. In addition, embryos 4 days after induction (E6.5, E10.5, fixation) were observed for Tg cells and normal cells. The results of the preparation are as follows: Tg cells exist in the presence of the Tg cells, and the Tg cells are excluded. This is why research plans are so complex and heterogeneous that they allow for "cell coordination" and organizational integration.