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REGULATION OF BACTERIOPHAGE P2 LATE GENE EXPRESSION

噬菌体 P2 晚期基因表达的调控

基本信息

批准号：
3286007
负责人：
GAIL E CHRISTIE
金额：
$ 17.48万
依托单位：
VIRGINIA COMMONWEALTH UNIVERSITY
依托单位国家：
美国
项目类别：
财政年份：
1985
资助国家：
美国
起止时间：
1985-09-05 至 1992-08-31
项目状态：
已结题

项目摘要

The studies proposed in this application are aimed at understanding the mechanisms for late gene expression in the temperate coliphage P2. P2 late promoters do not resemble sequences normally recognized by E. coli RNA polymerase, although the host enzyme is required for late transcription. Normal expression of P2 late genes requires the P2 DNA replication genes and the product of the P2 ogr gene. Transactivation of P2 late genes by P4 requires the product of the P4 delta gene and initiates transcription at the same sites as normal P2 late gene expression. The functional domains of P2 late gene promoters will be defined by deletion analysis and in vitro mutagenesis. The interactions between purified P2 ogr protein, late promoters and host RNA polymerase will be investigated using chemical and kinetic methods. An additional P2-encoded factor which appears to be required for expression of P2 late genes will be isolated and its effect on late gene transcription will be studied in vitro. A point mutation in the alpha subunit of E. coli RNA polymerase specifically blocks P2 late gene transcription. Additional RNA polymerase mutants which map to the alpha subunit and affect P2 late transcription will be isolated and characterized. The effects of amino acid substitution in the ogr protein will be studied using different amber suppressors. The interactions between temperate coliphage P2 and satellite phage P4 provide a unique model system for studying the modulation of promoter specificity of E. coli RNA polymerase, and should lead to new insights into how RNA polymerase recognizes sequences in DNA.

本申请中提出的研究旨在了解温性大肠杆菌噬菌体中晚期基因表达的机制 P2. P2晚期启动子与正常序列不相似 E.大肠杆菌RNA聚合酶，尽管宿主酶是需要后期转录。 P2晚期正常表达基因需要P2 DNA复制基因和P2 DNA复制基因的产物。 P2 ogr基因。 P4对P2晚期基因的反式激活需要： P4 δ基因的产物，并在转录起始位点启动转录。与正常P2晚期基因表达相同的位点。功能 P2晚期基因启动子的结构域将通过缺失来定义分析和体外诱变。之间的相互作用纯化的P2 ogr蛋白、晚期启动子和宿主RNA聚合酶将使用化学和动力学方法进行研究。一个额外的P2编码因子，这似乎是必要的 P2晚期基因的表达将被分离，其对晚期将在体外研究基因转录。中的点突变 E.大肠杆菌RNA聚合酶特异性阻断P2 晚期基因转录另外的RNA聚合酶突变体，映射到α亚基并影响P2后期转录，分离并表征。氨基酸替代的影响将使用不同的琥珀酰亚胺抑制剂温性大肠杆菌噬菌体P2与卫星噬菌体P4提供了一个独特的模型系统，调节E. coli RNA聚合酶，和这将使我们对RNA聚合酶如何识别 DNA序列。

项目成果

期刊论文数量（11）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Mutations affecting two adjacent amino acid residues in the alpha subunit of RNA polymerase block transcriptional activation by the bacteriophage P2 Ogr protein.

影响 RNA 聚合酶 α 亚基中两个相邻氨基酸残基的突变会阻止噬菌体 P2 Ogr 蛋白的转录激活。

DOI：
10.1128/jb.176.24.7430-7438.1994
发表时间：
1994
期刊：
Journal of bacteriology
影响因子：
3.2
作者：
Ayers,DJ;Sunshine,MG;Six,EW;Christie,GE
通讯作者：
Christie,GE

Purification and properties of the bacteriophage P2 ogr gene product. A prokaryotic zinc-binding transcriptional activator.

噬菌体 P2 ogr 基因产物的纯化和特性。

DOI：
发表时间：
1990
期刊：
The Journal of biological chemistry
影响因子：
0
作者：
Lee,TC;Christie,GE
通讯作者：
Christie,GE

Molecular cloning and characterization of bacteriophage P2 genes R and S involved in tail completion.

参与尾部完成的噬菌体 P2 基因 R 和 S 的分子克隆和表征。

DOI：
10.1006/viro.1994.1199
发表时间：
1994
期刊：
Virology
影响因子：
3.7
作者：
Linderoth,NA;Julien,B;Flick,KE;Calendar,R;Christie,GE
通讯作者：
Christie,GE

Nucleotide sequence of the genes encoding the major tail sheath and tail tube proteins of bacteriophage P2.

DOI：
10.1016/0042-6822(91)90502-3
发表时间：
1991-03
期刊：
Virology
影响因子：
3.7
作者：
Larissa K. Temple;S. Forsburg;R. Calendar;Gail E. Christie;Gail E. Christie
通讯作者：
Larissa K. Temple;S. Forsburg;R. Calendar;Gail E. Christie;Gail E. Christie

Site-directed mutagenesis of an amino acid residue in the bacteriophage P2 ogr protein implicated in interaction with Escherichia coli RNA polymerase.

噬菌体 P2 ogr 蛋白中与大肠杆菌 RNA 聚合酶相互作用有关的氨基酸残基的定点诱变。