Transgenic fish as biosensors for superfund chemicals

转基因鱼作为超级化学品的生物传感器

基本信息

  • 批准号:
    6664589
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 8.64万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    美国
  • 项目类别:
  • 财政年份:
    2002
  • 资助国家:
    美国
  • 起止时间:
    2002-09-25 至 2003-03-31
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

Transgenic fish will be used to study the effect of pesticides upon gene expression of transgenic reporter genes that report changes in the estrogen-responsive, retinoic acid-responsive pathways in developing fish and in the development of the nervous system. Our hypothesis are: 1) Liver reporter transgenic fish embryos and larvae can be used as biosensors to detect whole organism effects of environmental toxicants. 2) There may be unique windows of sensitivity of chemicals which impact upon the estrogen receptor signal transduction pathway that can be detected and evaluated in fish models. 3) Dicistronic reporter genes will allow for both tissue specific expression studies plus quantitative evaluation of toxicants upon whole fish embryos. 4) Transgenic techniques developed for the zebrafish can be used for indigenous species such as the killifish, Fundulus heteroclitus. The specific aims of this proposal are: I. To explore the use of transgenic zebrafish models to screen several superfund chemicals for detectable differences of GFP expression. II. To examine the behavior and incorporation of the GFP positive primordial germ cells into the developing reproductive tract and to see if there are biological effects upon sexual determination of the fish through treatment with pesticides investigated in specific aim I. III. To develop dicistronic vectors for the appropriate transgenic promoters that will allow for ligand inducible expression of both a luciferase gene (for quantitative measurement) and a GFP gene (for anatomical localization of signal). IV. To develop Fundulus models with the most appropriate transgenes based upon the results of specific aims I and II.
转基因鱼将用于研究农药对转基因报告基因表达的影响,该报告基因报告鱼类发育和神经系统发育中雌激素反应、视黄酸反应途径的变化。我们的假设是:1)肝脏报告基因转基因鱼胚胎和幼虫可用作生物传感器来检测环境毒物对整个生物体的影响。 2) 影响雌激素受体信号转导途径的化学物质可能存在独特的敏感性窗口,可以在鱼类模型中检测和评估。 3) 双顺反子报告基因将允许组织特异性表达研究以及对全鱼胚胎毒物的定量评估。 4) 为斑马鱼开发的转基因技术可用于本土物种,例如鳉鱼、异斜眼底鱼。本提案的具体目标是: I. 探索使用转基因斑马鱼模型筛选几种超级基金化学品,以检测可检测的 GFP 表达差异。二.检查 GFP 阳性原始生殖细胞的行为和并入发育中的生殖道,并观察通过特定目标 I 中研究的农药处理对鱼的性别决定是否有生物影响。为适当的转基因启动子开发双顺反子载体,允许配体诱导表达荧光素酶基因(用于定量​​测量)和 GFP 基因(用于信号的解剖定位)。四.根据特定目标 I 和 II 的结果,开发具有最合适转基因的眼底模型。

项目成果

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