CRYSTAL STRUCTURE OF MOLECULAR CHAPERONE, HSC20

分子伴侣 HSC20 的晶体结构

• 批准号: 6586717
• 负责人: LARRY E VICKERY
• 金额: $ 14.32万
• 依托单位: STANFORD UNIVERSITY
• 依托单位国家: 美国
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 美国
• 起止时间: 2002-03-01 至 2003-02-28
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://reporter.nih.gov/project-details/6586717
• 关键词: bioimaging /biomedical imaging; biomaterials; biomedical resource; proteins; radiography; structural biology

Molecular chaperones play key roles in protein folding, transport and across membranes, and in response to stressful stimuli. Hsc20 is a DnaJ-type cochaperone protein encoded in a recently discovered operon in E. coli which encodes a DnaK/hsp70type chaperone. No structure for a DnaJ co-chaperone has been determined although a solution MNR structure of the N-terminal 'Jdomain (100 residues) of DnaJ has revealed secondary structure features.We succeeded in overexpressing, purifying and crystallizing Hsc20. Thus, Hsc20 could provide the first complete high resolution crystal structure for proteins of this class. Diffraction data for the native protein have been obtained to 2.6A using conventional x-ray sources. We prepared two heavy atom derivatives by introducing cysteine residues into protein mutagenesis. Crystals of Hg-labeled crystals are too small to provide data for MIR phasing using our x-ray source, and we seek to determine higher resolution data using the synchrotron radiation source.

分子伴侣在蛋白质折叠、运输中发挥关键作用 跨膜，并对压力刺激做出反应。 HSC20 是 最近发现的一种 DnaJ 型辅助伴侣蛋白编码 大肠杆菌中的操纵子，编码 DnaK/hsp70 型伴侣。 不 DnaJ 共伴侣的结构已确定，尽管 N端'J结构域（100个残基）的溶液MNR结构 DnaJ揭示了二级结构特征。我们成功地 过表达、纯化和结晶 Hsc20。 因此，Hsc20 可以 提供第一个完整的高分辨率晶体结构 此类蛋白质。 天然蛋白质的衍射数据有 使用传统的 X 射线源可获得 2.6A 的电流。 我们准备了 通过将半胱氨酸残基引入到两个重原子衍生物中 蛋白质突变。 Hg 标记晶体的晶体太小，无法 使用我们的 X 射线源提供 MIR 定相数据，我们力求 使用同步加速器辐射确定更高分辨率的数据 来源。