HTLV-1 Particle Analysis and Gag Interactions

摘要： 人类T细胞白血病病毒(HTLV-1)在全球范围内感染了约1500万至2000万人，是其病因之一。 作为成人T细胞白血病/淋巴瘤患者(ATLL)的代理人，他们也可能导致一种炎症性疾病和综合征。 被称为HTLV-1相关的脊髓病(HAM)/热带痉挛性截瘫(TSP)。 不同地区的抗体患病率不同，成年人的抗体患病率从0.2%到10%不等。这意味着抗体的流行率。 随着年龄、年龄和年龄的增加，年龄增加也会影响多达20%到50%的60岁及以上女性人口。 中国人臭名昭著，因为在细胞培养中很难研究这些问题，这也禁止了对这些问题进行更严格的科学分析。 病毒可以在细胞中复制病毒，包括逆转录病毒组装过程中涉及的步骤。以下是逆转录病毒如何作用的更多细节。 当粒子组装发生时，人们对其了解很少，甚至对于其他更难处理的逆转录病毒检测系统也是如此，比如一种病毒。 人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)。例如，最近的一项研究证据表明，人类免疫缺陷病毒是一种恶作剧。 不同的逆转录病毒之间的相互作用可能有所不同，这有助于解释我们还没有记录的形态上的差异。 在未成熟的逆转录病毒颗粒中，还有与膜结合的非点状病毒(NP)的主要作用。 在细胞到细胞之间接触的新语境下，生物发生学以及生物发生学的基本性质。 此外，对于逆转录病毒的组装途径的各个方面，人们仍然知之甚少。但这一点对HTLV-1尤其如此。 我们已经发现，在人类免疫缺陷病毒的主要作用方面，从根本上讲，这两个国家之间存在着明显的差异。 在Punta的生物发生学中，膜结合的NNP是一种堵塞物。在这一应用中，我们将提出继续我们的研究的方法。 研究重点是HTLV-1不成熟的基因和成熟的基因粒子的结构，以及通过其创新的基因表达的粒子的生物发生。 最先进的实验性研究方法，以及适当的、与艾滋病毒-1相关的比较分析。尤其是我们。 将应用低温电子显微镜/断层扫描技术(Cryo-EM/ET)，即光激活显微定位技术(Palm)，。 全内反射荧光显微镜(TIRF)和显微技术是当今世界上最新的激光扫描荧光技术。 活体细胞中的波动光谱分析(FFS)将进一步调查未成熟的HTLV-1和晶格的分析方法。 结构，2)在HTLV-1和HTLV-1中膜结合、NP和GAG的重要性；3)HTLV-1。 粒子与生物发生是在细胞-细胞-细胞接触的背景下进行的。仔细的数据比较可能不会与HIV-1一起完成。 新颖的研究将利用创新的电子技术，以便更好地为一项具有高度重要性的技术和技术提供新的科学见解。 人们对HTLV-1纳米粒子组装工艺的方面了解很少，这一工艺从根本上与传统工艺截然不同。 HIV-1感染和其他逆转录病毒。此外，我们的研究代表了进行的最详细的研究中的一些。 在病毒和结构蛋白的组装过程中，它从根本上提供了一些重要的病毒学信息。 病毒的主要分子生物学性质是病毒粒子的组装，它位于被包裹的病毒的细胞膜表面。

Abstract  Human  T-­cell  leukemia  virus  (HTLV-­1)  infects  about  15-­20  million  individuals  worldwide  and  is  the  etiological  agent of an adult T-­cell leukemia/lymphoma (ATLL), and can also result in an inflammatory disease syndrome  called HTLV-­1-­associated myelopathy (HAM)/tropical spastic paraparesis (TSP).  HTLV-­1 antibody prevalence  rates  vary  among  geographical  areas,  ranging  from  0.2  to  10%  among  adults.  This  antibody  prevalence  increases with age, and can affect as much as 20 to 50% of the female population aged 60 and above. HTLV-­1  is  notorious  for  being  difficult  to  study  in  cell  culture,  which  has  prohibited  a  rigorous  analysis  of  how  these  viruses  replicate  in  cells,  including  the  steps  involved  in  retrovirus  assembly.    The  details  for  how  retrovirus  particle  assembly  occurs  are  poorly  understood  even  for  other  more  tractable  retroviral  systems  like  that  of  human  immunodeficiency  virus  type  1  (HIV-­1).    For  instance,  recent  evidence  indicates  that  Gag-­Gag  interactions differ among retroviruses, which helps explain morphological differences that we have documented  among immature retrovirus particles. Furthermore, the role for membrane-­bound, non-­punctate (np) Gag in the  biogenesis of Gag puncta, as well as the nature of Gag puncta biogenesis in the context of cell-­to-­cell contacts  also remain poorly understood aspects of the retrovirus assembly pathway. This is particularly for HTLV-­1, for  which  we  have  found  to  have  fundamentally  distinct  differences  to  that  of  HIV-­1  regarding  the  role  of  membrane-­bound  np  Gag  in  Gag  punta  biogenesis.    In  this  application,  we  propose  to  continue  our  investigations  on  HTLV-­1  immature  and  mature  particle  structure  and  particle  biogenesis  through  innovative  state-­of-­the-­art experimental approaches with appropriate comparative analyses with HIV-­1.  In particular, we  will apply cryo-­electron microscopy/tomography (cryo-­EM/ET), photoactivated localization microscopy (PALM),  total  internal  reflection  fluorescence  (TIRF)  microscopy  and  the  novel  technology  of  z-­scan  fluorescence  fluctuation  spectroscopy  (FFS)  in  living  cells  to  investigate  1)  analysis  of  immature  HTLV-­1  Gag  lattice  structure,  2)  the  importance  of  membrane-­bound,  np  Gag  in  HTLV-­1  particle  biogenesis,  and  3)  HTLV-­1  particle  biogenesis  in  the  context  of  cell-­cell  contacts.  Careful  comparisons  will  be  done  with  HIV-­1.  These  novel  studies  harness  innovative  technologies  in  order  to  provide  new  insights  into  a  highly  significant  and  poorly understood aspect of the HTLV-­1 particle assembly process, which is fundamentally distinct from that of  HIV-­1 and other retroviruses. Furthermore, our studies represent some of the most detailed studies conducted  on the assembly of virus structural proteins, which provides fundamentally important information in virology on  the molecular nature of virus particle assembly at the plasma membrane for enveloped viruses.