Recherche d'enzymes thermophiles d'intérêt industriel par une approche métagénomique

国际工业嗜热酶研究

• 批准号: 321851-2005
• 负责人: Juteau, Pierre
• 金额: $ 12.86万
• 依托单位: Institut national de la recherche scientifique
• 依托单位国家: 加拿大
• 项目类别: Strategic Projects - Group
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 加拿大
• 起止时间: 2006-01-01 至 2007-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://www.nserc-crsng.gc.ca/ase-oro/Details-Detailles_eng.asp?id=340901
• 关键词: Recherche; enzymes; thermophiles; int; industriel

Les enzymes sont utilisées dans diverses industries pour remplacer des produits chimiques agressifs nuisibles à l'environnement. Pour rester compétitives et améliorer leurs produits, les industries doivent trouver de nouvelles enzymes plus efficaces, plus résistantes et avec un spectre d'activité plus large. Comme ces enzymes proviennent généralement de micro-organismes, leur découverte passe traditionnellement par l'isolation en culture pure de micro-organismes producteurs à partir d'échantillons environnementaux. Cependant, puisque seul 1% des micro-organismes existants peuvent ainsi être obtenus en laboratoire en culture pure, 99% des enzymes présents dans la nature échappent à cette méthode. La métagénomique permet de contourner ce problème. Dans cette approche, tout l'ADN d'un échantillon environnemental est extrait et cloné dans une bactérie cultivable en laboratoire. On forme donc une « métagénothèque » contenant des milliers de clones dans lesquels est réparti le matériel génétique de la microflore de l'échantillon. Ensuite, ces clones sont criblés pour identifier ceux qui contiennent des gènes codant pour des enzymes d'intérêt industriel.       Le présent projet utilise donc la métagénomique pour trouver de nouvelles enzymes de type protéase, lipase et glycohydrolases démontrant, entre autres, une bonne thermostabilité. La microflore qui sert de source de gènes sera obtenue par un enrichissement en bioréacteurs aérobies thermophiles (55-70°C) recevant divers substrats d'intérêt (extrait de viande, huile, chitine, etc.). La métagénothèque sera formée par l'extraction de l'ADN d'un échantillon composite provenant des bioréacteurs et par le clonage de cet ADN dans un vecteur navette capable d'être utilisé par E. coli, Pseudomonas, Streptomyces et Bacillus. Deux stratégies de criblage robotisé seront utilisées, soit par hybridation sur puce d'ADN avec des sondes visant des gènes d'intérêt et par tests enzymatiques à l'aide de plaques de 96 puits et de substrats fluorogéniques. Les clones positifs seront caractérisés et séquencés, et les plus intéressants seront clonés dans des vecteurs d'expression. Les enzymes seront ensuite produites en fermenteur et testées en conditions industrielles.

这种酶在不同的行业中都有广泛的应用，它们可以替代产品、技术、技术和环境。将混合酶与混合酶结合起来，将混合酶与混合酶结合起来，将混合酶与混合酶结合起来，将混合酶与混合酶结合起来，将混合酶与混合酶结合起来。Comme酶提供的微生物是通过传统的元件分离培养出来的，纯微生物是通过生产者的分离培养出来的。独立的，独特的seul 1%的微生物存在于实验室中，在实验室中培养纯的，99%的酶存在于自然中，在实验室中培养纯的。La msamtagsamique permet de conconner ce problem。这是一种新的方法，它可以在实验室中培育出一种新的环境测试方法，可以在实验室中培育出一种新的环境测试方法。1 .关于“ msamtagacnoth<e:1> ”的内容，关于“ msamtagacnoth<e:1> ”的内容，关于“ msamtagacnoth<e:1> ”的内容，关于“ msamtagacnoth<e:1> ”的内容，关于“ msamtagacnoth<e:1> ”的内容，关于“ msamtagacnoth<e:1> ”的内容。Ensuite， ces克隆体sonblassei ei标识符ceeux大陆des g<s:1> codant pour des enzymes and 'intérêt industriel。该项目利用donc la msamtagsamomique pour trouver de nouvelles酶、脂肪酶和糖苷水解酶、centres、ne bonne热稳定剂。La microflora qui sert de source de g<s:1> nes sera通过嗜热菌（55-70°C）和最近的潜水底物（extrait de viande, huile， chitine等）在生物体内获得了丰富的蛋白质。La metagenotheque血清formee par l 'extraction de l 'ADN d一个样本组合provenant des bioreacteurs et par le clonage de cet(中央东部东京)与向量在navette能够理由利用大肠杆菌,假单胞菌,链霉菌属杆菌。两种结构的<s:1>机械组织- - -使用- - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -Les克隆阳性的是阳性的、阳性的、阳性的、阳性的、阳性的、阳性的、阳性的、阳性的、阳性的、阳性的、阳性的。酵素在发酵过程中会产生酵素，在工业条件下会产生酵素。