Evaluation du marché du TagR comme une nouvelle étiquette de fusion pour faciliter la surexpression, la solubilisation et la purification des protéines

评估 TagR 促进表面表达、溶解和蛋白质纯化的新融合技巧

• 批准号: 490856-2015
• 负责人: Salesse, Christian
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Université Laval
• 依托单位国家: 加拿大
• 项目类别: Idea to Innovation
• 财政年份: 2015
• 资助国家: 加拿大
• 起止时间: 2015-01-01 至 2016-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://www.nserc-crsng.gc.ca/ase-oro/Details-Detailles_eng.asp?id=586645
• 关键词: Evaluation; du; march; TagR; comme

La technologie de l'ADN recombinant a permis de cloner de très nombreuses protéines de différents organismes. Cependant, la production de protéines recombinantes fait souvent face à des problèmes importants de solubilité, de purification et de faibles rendements de surexpression. Ces contraintes sont généralement résolues en utilisant une étiquette de fusion qui permet à la fois d'augmenter le niveau de surexpression de la protéine d'intérêt ainsi que sa solubilité et sa pureté. On retrouve sur le marché de petites étiquettes (v.g. une queue de 6-10 histidines) ainsi que des étiquettes protéiques. Les petites étiquettes permettent généralement de purifier les protéines d'intérêt mais elles n'augmentent pas leur solubilité. La majorité des étiquettes protéiques permettent uniquement la purification des protéines d'intérêt. Seulement certaines de ces étiquettes permettent d'augmenter à la fois la surexpression, la solubilité et la pureté des protéines d'intérêt. Le "Gold Standard" des protéines d'intérêt est la GST (Glutatione-S-Transférase). Nous voulons poursuivre le développement de notre nouvelle étiquette protéique, appelée la TagR, dont les propriétés sont supérieures à celles de la GST. Les propriétés de ces deux étiquettes protéiques ont été comparées en utilisant jusqu'à maintenant deux protéines d'intérêt, la Lécithine : rétinol acyltransférase et la Rétinitis pigmentosa 2. Les avantages de la TagR en tant qu'étiquette de fusion sont les suivants : 1) c'est à la fois une étiquette de solubilité et de purification (similaire à la GST), 2) elle permet un rendement plus élevé de surexpression et une solubilité accrue des deux protéines d'intérêt comparativement à la GST, 3) une seule étape est nécessaire pour purifier les protéines d'intérêt (similaire à la GST), 4) cette technologie peut être offerte à un coût compétitif, 5) la présence de détergent ne cause pas de problème pour la purification des protéines d'intérêt, ce qui est impossible avec la GST.

La technologie de l'ADN 重组技术允许克隆不同的非同种蛋白 有机体。悬而未决，重组蛋白的生产面临着重要的问题 超表达的溶解、净化和还原。一般性限制 解决如何使用融合礼仪和增强表面表达的方法 蛋白质内部含有溶解性和纯净性。回顾小礼仪市场 (v.g. une 6-10 组氨酸队列）ainsi que des étiquettes protéiques。一般小礼仪 内部蛋白质纯化剂可增强溶解度。礼仪礼仪委员会 内部蛋白质纯化的永久独特性。永久礼仪的确定 增强表面表达、溶解性和内部蛋白质的纯净。勒“黄金标准” Protéines d'intérêt est la GST（谷胱甘肽-S-转移酶）。为巴黎的发展而努力 新的礼仪规范，appelée la TagR，不属于 GST 的高级属性。莱斯 两个协议的属性与维护两个协议的比较 卵磷脂：视黄醇酰基转移酶和色素性视网膜炎 2. TagR 的优势 qu'étiquette de fusion sont les suivants : 1) c'est à la fois une étiquette de solubilité et de Purification (类似 à la GST), 2) elle permet un rendement plus élevé de surexpress et une solubilité accrue des deux protéines 与 GST 的内部比较，3) 需要净化内部蛋白质 （与 GST 类似），4) cette technologie peut être Offerte à un coût compétitif, 5) la présence de détergent ne 由于纯化蛋白质的问题，这在 GST 中是不可能的。