Evaluation du marché du TagR comme une nouvelle étiquette de fusion pour faciliter la surexpression, la solubilisation et la purification des protéines

评估 TagR 促进表面表达、溶解和蛋白质纯化的新融合技巧

• 批准号: 490856-2015
• 负责人: Salesse, Christian
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Université Laval
• 依托单位国家: 加拿大
• 项目类别: Idea to Innovation
• 财政年份: 2015
• 资助国家: 加拿大
• 起止时间: 2015-01-01 至 2016-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://www.nserc-crsng.gc.ca/ase-oro/Details-Detailles_eng.asp?id=586645
• 关键词: Evaluation; du; march; TagR; comme

La technologie de l'ADN recombinant a permis de cloner de très nombreuses protéines de différents organismes. Cependant, la production de protéines recombinantes fait souvent face à des problèmes importants de solubilité, de purification et de faibles rendements de surexpression. Ces contraintes sont généralement résolues en utilisant une étiquette de fusion qui permet à la fois d'augmenter le niveau de surexpression de la protéine d'intérêt ainsi que sa solubilité et sa pureté. On retrouve sur le marché de petites étiquettes (v.g. une queue de 6-10 histidines) ainsi que des étiquettes protéiques. Les petites étiquettes permettent généralement de purifier les protéines d'intérêt mais elles n'augmentent pas leur solubilité. La majorité des étiquettes protéiques permettent uniquement la purification des protéines d'intérêt. Seulement certaines de ces étiquettes permettent d'augmenter à la fois la surexpression, la solubilité et la pureté des protéines d'intérêt. Le "Gold Standard" des protéines d'intérêt est la GST (Glutatione-S-Transférase). Nous voulons poursuivre le développement de notre nouvelle étiquette protéique, appelée la TagR, dont les propriétés sont supérieures à celles de la GST. Les propriétés de ces deux étiquettes protéiques ont été comparées en utilisant jusqu'à maintenant deux protéines d'intérêt, la Lécithine : rétinol acyltransférase et la Rétinitis pigmentosa 2. Les avantages de la TagR en tant qu'étiquette de fusion sont les suivants : 1) c'est à la fois une étiquette de solubilité et de purification (similaire à la GST), 2) elle permet un rendement plus élevé de surexpression et une solubilité accrue des deux protéines d'intérêt comparativement à la GST, 3) une seule étape est nécessaire pour purifier les protéines d'intérêt (similaire à la GST), 4) cette technologie peut être offerte à un coût compétitif, 5) la présence de détergent ne cause pas de problème pour la purification des protéines d'intérêt, ce qui est impossible avec la GST.

ADN重组技术允许不同种类蛋白的克隆 有机体然而，重组蛋白的生产必须面对重要的问题 溶解度、纯化度和表达的不稳定性。这些约束是一般性的 résolues en utilisant une étiquette de fusion qui permet à la fois d'augmenter le niveau de sureexpression de la 蛋白质是一种可溶解和纯净的蛋白质。关于retrouve sur le marché de petites étiquettes（v.g. une 队列6-10组氨酸）ainsi que des étiquettes protéiques. Les petites étiquettes permettent généralement de purifier les protéines d'intérêt迈斯elles n'augmentent pas passive solubilité. La majorité des étiquettes protéiques 允许对蛋白质进行纯化。确保这些物品的安全 d'augmenter à la fois la sureexpression，la solubilité et la pureté des Protéines d'intérêt. Le“Gold Standard”des Protéines d'intérêt est la GST（Glutatione-S-Transférase）.我们的梦想是实现我们的梦想 nouvelle étiquette protéique，appelée la TagR，dont les propriétés sont supérieures à celles de la GST. Les 两个保护体的所有权仅在两个保护体之间进行比较 d'intérêt，la Lécithine：rétinol acyloproteinase et la Rétitis pigmentosa 2. Les avantages de la TagR en tant qu'étiquette de fusion sont les suivants：1）c'est à la fois une étiquette de solubilité et de purification（similaire à la GST），2）两种蛋白的表达和溶解度增加 3）必须使用一个胶带来纯化利益蛋白 （similaire à la GST），4）cette technologie peut être offerte à un coconut compétif，5）la présence de détergent ne 因为没有纯化蛋白的问题，这是不可能的。