Structural Biology of Miz-1 and of C2H2 Zinc Fingers

Miz-1 和 C2H2 锌指的结构生物学

• 批准号: 227919-2013
• 负责人: Lavigne, Pierre
• 金额: $ 3.13万
• 依托单位: Université de Sherbrooke
• 依托单位国家: 加拿大
• 项目类别: Discovery Grants Program - Individual
• 财政年份: 2019
• 资助国家: 加拿大
• 起止时间: 2019-01-01 至 2020-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://www.nserc-crsng.gc.ca/ase-oro/Details-Detailles_eng.asp?id=688712
• 关键词: Structural; Biology; Miz; C2H2; Zinc

Cette programmation de recherche porte sur la biologie structurale de la liaison spécifique à l'ADN par Miz-1, un facteur de transcription contenant plusieurs doigts de Zinc (DZ) de type C2H2. Nous nous concentrerons sur l'interaction entre Miz-1 et les promoteurs proximaux des gènes p15INK4b (p15) et p21CIP1 (p21). Miz-1, lie directement ces promoteurs et active la transcription de p15 et p21. Plus de 700 gènes codent pour des facteurs de transcription à DZ C2H2 multiples (en moyenne 8 par gène). Les DZ de type C2H2 sont de petits domaines protéiques (~30 résidus) classiquement reconnu pour leur liaison spécifique à l'ADN. Cependant, un nouveau paradigme se dessine pour la biologie structurale et la fonction de ces facteurs de transcription. En effet, on propose que des sous-ensemble de DZ seraient spécialisés dans la liaison à l'ADN tandis que d'autres seraient plutôt aptes à lier d'autres protéines. Miz-1 contient 13 séquences consensus pour des DZ C2H2. En accord avec le paradigme émergent, les 4 premiers DZ de Miz-1 interagissent avec Smad3. Cette interaction est importante pour l'activation de la transcription de p15 et p21. D'un autre côté, nous ne savons pas quels sont les DZ qui interagissent avec l'ADN promotrice de p15 et p21. Dans ce contexte et en utilisant des approches expérimentales tels que la Résonance Magnétique Nucléaire, la Microscopie à Force Atomique, la Titration Calorimétrique Isotherme, les gels retards (EMSA) nous proposons: 1- De déterminer quels DZ sur Miz-1 interagissent avec l'ADN des régions promotrices de p15 et p21, 2- De résoudre la structure RMN des DZ 1 à 4 et 11 à 13 (nous avons déjà résolu les structures des DZ 5 à 10) et des complexes spécifiques avec l'ADN, 3- D'élucider le mode d'interaction the les DZ 1 à 4 de Miz-1 et Smad3 et 4- Investiguer l'effet de la liaison de Miz-1 sur la topologie des promoteurs proximaux de p15 et p21. Ainsi, nous contribuerons à l'essor d'un nouveau paradigme qui pourrait aider dans la compréhension de la fonction de près 700 gènes de notre génome et améliorer notre compréhension des mécanismes régulant l'expression de p15 et p21, deux gènes extrêmement important dans le cycle cellulaire.

这一研究项目涉及与ADN的特定联系的生物学结构，涉及一种转录因子，含有C2 H2型锌（DZ）。我们关注Miz-1与p15 INK 4 b（p15）和p21 CIP 1（p21）基因的近端启动子之间的相互作用。Miz-1直接启动并激活p15和p21的转录。加上700个用于DZ C2 H2倍数转录的代码（通常8个）。Les DZ de type C2H2 sont de petits domaines protéiques（~30 résidus）classiquement recognu pour natural liaison spécifique à l'ADN.此外，一种新的结构生物学范式和转录因子的基础。实际上，建议DZ特别小组与ADN联络，使其他人也能与其他人的蛋白质联络。Miz-1 contient 13 séquences consensus pour des DZ C2H2.在雅阁与范式的紧急情况下，les 4总理DZ de Miz-1 interagissent与斯马德3。这种相互作用对于p15和p21转录的激活是重要的。在另一个地方，我们不知道DZ与第15页和第21页的ADN之间的互动。在此背景下，并利用核磁共振、原子力显微镜、恒温量热滴定、凝胶阻滞（EMSA）等实验方法，我们提出了以下建议：1- De determiner quels DZ sur Miz-1 interagissent avec l'ADN des régions promotrices de p15 et p21，2-研究DZ 1至4和11至13的RMN结构（我们解决了DZ 5到10的结构）和与ADN的特殊复合物，3-阐明了DZ 1与Miz-1和Smad 3的相互作用方式，4-研究了Miz-1与P15和P21近端推进剂的拓扑关系对DZ 1与Miz-4相互作用的影响。此外，我们为一个新的范例做出了贡献，这个范例有助于我们理解700个基因的基础，也有助于我们理解调节p15和p21表达的机制，这两个基因在细胞周期中非常重要。