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SIRT1对猪骨髓间充质干细胞成脂分化的控性机制
结题报告
批准号:
30970356
项目类别:
面上项目
资助金额:
34.0 万元
负责人:
杨在清
依托单位:
学科分类:
C0403.动物生理与行为
结题年份:
2012
批准年份:
2009
项目状态:
已结题
项目参与者:
周磊、袁继红、彭音、龙勤强、张建、龙欢、陈华平
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中文摘要
沉默信号调节子1(SIRT1)是最近发现的Sirtuins家族的重要成员,一种典型的成脂负调控因子,在成脂分化中具有重要调控作用。本研究似以猪骨髓间充质干细胞(MSCs)成脂分化为模型,通过免疫细胞化学、基因转染、定量PCR、RNA干扰、酵母双杂交、电泳迁移率变动实验(EMSA)、染色质免疫共沉淀(ChIP)等方法,系统观察MSCs成脂分化过程中细胞和亚细胞(包括脂肪滴的大小和数量等)的形态变化,分析脂肪细胞分化标志因子基因的表达水平,MSCs细胞成脂过程中SIRT1及其相关基因的时空表达规律,SIRT1过量表达或Knock-down对MSCs成脂分化的影响,SIRT1 基因的上下游调控因子及调控机制。以解析SIRT1基因表达与MSCs成脂分化调控的分子机制,为猪干细胞成脂分化及调控分子基础的进一步阐明提供依据。
英文摘要
项目在成功分离梅山猪骨髓间充质干细胞(MSC)的基础上,分析了该细胞的生长及形态特征,多能性;完成了MSCs细胞的成脂分化,构建了猪MSCs细胞的成脂分化细胞模型;并在此基础上对SIRT1调控猪骨髓间充质干细胞成脂分化及其相关机制进行了系统研究,获得了一下研究成果:①梅山猪SIRT家族基因1-7的克隆、结构及物种进化以及组织表达谱的分析比较;②猪SIRT1-2基因启动子及上游调控因子分析,包括克隆SIRT1基因5’侧翼4993bp的序列和SIRT2基因5’侧翼2876bp的序列,并已做转录因子结合位点分析;SIRT1部分表位编码区的原核表、多克隆抗体制备,SIRT1、SIRT2真核表达载体和RNAi载体构建;③SIRT1基因的表达及调控:转录及翻译水平的分析表明,LPS与Resistin均可下调SIRT1的表达,但LPS的下调作用可被SIRT1的激活剂白藜芦醇抵消,而Resistin对SIRT1的下调作用不能被白藜芦醇所抵消,这表明LPS和Resistin对SIRT1的下调作用可能具有各自的途径;④SIRT1基因的敲减分析;⑤SIRT1在脂肪细胞分化过程中的表达调控;⑥葡萄糖介导的SIRT家族基因的表达调控;⑦Resistin通过Visfatin及SIRT1下调靶基因PGC-1α的表达,导致细胞衰老;⑧SIRT1使PGC1a发生去乙酰化而增加线粒体数量;⑨SIRT1上游基因Visfatin的启动子调控;⑩KLF15对SIRT1上游基因Visfatin启动子调控。.项目研究成果在《Hepatology.》、《Endocrinology》、《Mol Cell Endocrinol》、《PLoS ONE》等SCI刊物上发表学术论文16篇(IF:59.437),国际会议特邀报告2篇,参加国内学术会议11人次;培养毕业研究生19名,其中博士生5名,硕士生14名。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
Molecular characterization, expression and chromosomal localization of porcine PNPLA3 and PNPLA4
猪 PNPLA3 和 PNPLA4 的分子特征、表达和染色体定位
DOI:10.1007/s10529-011-0591-y
发表时间:2011
期刊:Biotechnology Letters
影响因子:2.7
作者:Zhilong Chen;Xin Gao;T. Lei;Xiaodong Chen;Lei Zhou;An Yu;Peng Lei;Rongrong Zhang;H. Long;Zaiqing Yang
通讯作者:Zaiqing Yang
DOI:--
发表时间:--
期刊:Gene(IF:2.341)
影响因子:--
作者:Fenyun Wen;Xiaoyue Zhu;Xiaoling Yu;Zaiqing Yang
通讯作者:Zaiqing Yang
DOI:--
发表时间:--
期刊:Mol Cell Endocrinol (IF:4.192)
影响因子:--
作者:Jin D;Yu A;Gan L;Yang Z.
通讯作者:Yang Z.
Molecular cloning and characterization of the porcine Ero1L and ERp44 genes: Potential roles in controlling energy metabolism
猪 Ero1L 和 ERp44 基因的分子克隆和表征:在控制能量代谢中的潜在作用。
DOI:10.1016/j.ygcen.2011.05.014
发表时间:2011-09-01
期刊:GENERAL AND COMPARATIVE ENDOCRINOLOGY
影响因子:2.7
作者:Long, Qinqiang;Zhu, Xiaoyue;Yang, Zaiqing
通讯作者:Yang, Zaiqing
MEK/ERK pathway mediates insulin-promoted degradation of MKP-3 protein in liver cells. Mol Cell Endocrinol.
MEK/ERK 通路介导胰岛素促进的肝细胞中 MKP-3 蛋白的降解。
DOI:--
发表时间:--
期刊:Mol Cell Endocrinol (IF:4.192)
影响因子:--
作者:Feng B;Jiao P;Yang Z;Xu H
通讯作者:Xu H
猪BMSCs的成脂分化及FSP27蛋白的调控机制
  • 批准号:
    31172093
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    58.0万元
  • 批准年份:
    2011
  • 负责人:
    杨在清
  • 依托单位:
猪脂肪细胞分化与脂联素基因的表达调控
  • 批准号:
    30771585
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    30.0万元
  • 批准年份:
    2007
  • 负责人:
    杨在清
  • 依托单位:
猪脂联素介导的脂肪细胞分化调控机理
  • 批准号:
    30671532
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    8.0万元
  • 批准年份:
    2006
  • 负责人:
    杨在清
  • 依托单位:
猪脂肪细胞分化与C/EBP家族基因表达的调控作用
  • 批准号:
    30170674
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    17.0万元
  • 批准年份:
    2001
  • 负责人:
    杨在清
  • 依托单位:
猪脂肪沉积负相关因子的基因克隆及表达
  • 批准号:
    39870595
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    11.5万元
  • 批准年份:
    1998
  • 负责人:
    杨在清
  • 依托单位:
国内基金
海外基金