课题基金基金详情
HPV16 E7结合亲和体分子及其affitoxin对宫颈癌的靶向治疗研究
结题报告
批准号:
81172463
项目类别:
面上项目
资助金额:
57.0 万元
负责人:
张丽芳
依托单位:
学科分类:
H1815.肿瘤靶向治疗
结题年份:
2015
批准年份:
2011
项目状态:
已结题
项目参与者:
陈韶、李文姝、赵孔南、陆丽君、王乐丹、庞玲霞、陈昊、冯娟、吕艳
国基评审专家1V1指导 中标率高出同行96.8%
结合最新热点,提供专业选题建议
深度指导申报书撰写,确保创新可行
指导项目中标800+,快速提高中标率
客服二维码
微信扫码咨询
中文摘要
人乳头瘤病毒(HPV)L1蛋白疫苗已成功上市用于预防宫颈癌,但对已经感染HPV及其所致的宫颈癌和癌前病变,尚无特异性治疗方法,因此宫颈癌仍然威胁着全球妇女的身体健康。基于单克隆抗体及其片段的肿瘤分子靶向治疗已取得了重大的研究进展,但仍然存在毒副作用大、价格昂贵和稳定性差等问题急待解决。研究发现,来源于葡萄球菌蛋白A的亲和体(affibdoy)分子,具有以高亲和力与特定蛋白分子结合特性而类似抗体,同时穿透性好、易于制备和稳定性强等特性在应用方面比抗体更具可行性和优势。本研究拟通过分子生物学和噬菌体展示技术,筛选HPV16 E7特异性亲和体分子,并制备HPV16 E7特异性亲和体携带细菌毒素的重组蛋白(HPV16 E7 affitoxin),进一步通过细胞水平和动物水平验证其对宫颈癌细胞的分子靶向结合和治疗作用。为发展基于HPV16E7亲和体的宫颈癌特异性靶向治疗提供新途径,极具应用前景。
英文摘要
宫颈癌在全球女性人群中发病率和死亡率仍然居高不下,迄今尚无特异性治疗方法。基于单克隆抗体的分子靶向治疗为肿瘤的生物免疫治疗开创了崭新的途径,但仍有一些问题尚待解决,如毒副作用大和价格昂贵等。本研究针对上述问题开展研究,以葡萄球菌蛋白A亲和体(affibdoy)分子为基础,通过分子生物学和噬菌体展示技术,筛选了HPV16 E7结合亲和体分子(ZHPV16 E7 affibody),并制备HPV16 E7特异性亲和体携带细菌毒素的重组蛋白(ZHPV16 E7 affitoxin),进一步通过蛋白水平、细胞水平和荷瘤裸鼠(动物水平)对筛选的affibody及其affitoxin分子的分子靶向结合和肿瘤生长抑制作用进行了验证。(1)构建了ZHPV16 E7 affibody的随机组合噬菌体展示文库。(2)获得了ZHPV16 E7 affibody分子65个,选择了其中的4个(ZHPV16 E7:127,ZHPV16 E7:301,ZHPV16 E7:384,ZHPV16 E7:745)进行了原核表达,并制备了纯化蛋白。(3)利用SPR技术验证了筛选的ZHPV16 E7 affibody分子与HPV16 E7蛋白具有极高的亲和力。(4)利用免疫荧光共定位技术验证了筛选的ZHPV16 E7 affibody分子特异靶向宫颈癌细胞表达的HPV16 E7蛋白。(5)利用小动物成像技术验证了ZHPV16 E7 affibody分子具有快速靶向HPV16阳性肿瘤的特性。(6)利用原核表达系统制备并纯化了ZHPV16E7 affitoxin,验证了affitoxin 在蛋白水平、细胞水平及动物在体水平对HPV16 E7蛋白的靶向特异性。(7)对affibody及affitoxin的生物学特性进行了研究:半衰期、LD50和IC50等。(8)ZHPV16 E7 affitoxin 蛋白对宫颈癌荷瘤裸鼠的治疗作用:①成功建立了裸鼠宫颈癌细胞荷瘤模型;②验证了其对致瘤作用具有显著的抑制作用;③验证了其显著的靶向抑瘤作用,且毒副作用不明显。本研究为发展基于ZHPV16 E7 affibody的宫颈癌特异性靶向治疗提供新途径,极具应用前景。研究成果多次参加国内外学术会议交流。获成果2项,申报发明专利1项;发表论著8篇(SCI论文2篇),2篇论文分别正在评审和总结中;培养博士生1人,硕士研究生8人。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
DOI:--
发表时间:2014
期刊:温州医科大学学报
影响因子:--
作者:陈向敏;陈俊;薛向阳;张丽芳
通讯作者:张丽芳
DOI:--
发表时间:2014
期刊:温州医科大学学报
影响因子:--
作者:林晓云;刘巧琼;张丽芳;陈筱菲
通讯作者:陈筱菲
DOI:--
发表时间:2015
期刊:医学研究杂志
影响因子:--
作者:王乐丹;张丽芳
通讯作者:张丽芳
DOI:10.1186/s12943-015-0361-x
发表时间:2015-04-17
期刊:Molecular cancer
影响因子:37.3
作者:Zhang L;Wu J;Ling MT;Zhao L;Zhao KN
通讯作者:Zhao KN
DOI:--
发表时间:2015
期刊:温州医科大学学报
影响因子:--
作者:陈韶;薛向阳;朱珊丽;张丽芳
通讯作者:张丽芳
双靶点affibody分子及其对鼻咽癌细胞靶向作用机制研究
  • 批准号:
    81972550
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    55.0万元
  • 批准年份:
    2019
  • 负责人:
    张丽芳
  • 依托单位:
EB病毒LMP2特异性结合affibody分子的筛选及特性研究
  • 批准号:
    81372447
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    75.0万元
  • 批准年份:
    2013
  • 负责人:
    张丽芳
  • 依托单位:
沙眼衣原体主要外膜蛋白表位疫苗及其免疫效应研究
  • 批准号:
    30972669
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    33.0万元
  • 批准年份:
    2009
  • 负责人:
    张丽芳
  • 依托单位:
人乳头瘤病毒与EBV-LMP2多表位嵌合疫苗的免疫效应研究
  • 批准号:
    30671882
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    24.0万元
  • 批准年份:
    2006
  • 负责人:
    张丽芳
  • 依托单位:
人乳头瘤病毒-沙眼衣原体嵌合病毒样颗粒疫苗的研究
  • 批准号:
    30271191
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    20.0万元
  • 批准年份:
    2002
  • 负责人:
    张丽芳
  • 依托单位:
国内基金
海外基金