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肝癌侵袭转移中UC001kfo对α-SMA分子调控机制的研究
结题报告
批准号:
U1404309
项目类别:
联合基金项目
资助金额:
30.0 万元
负责人:
潘延凤
依托单位:
学科分类:
C0602.基因表达及非编码序列调控
结题年份:
2017
批准年份:
2014
项目状态:
已结题
项目参与者:
--
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中文摘要
侵袭转移是肝癌患者预后极差的主要原因。肝癌侵袭转移中,发挥关键作用的α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)受多种信号通路的调控,对其干预效果差。我们前期实验中发现一个新长链非编RNA UC001kfo通过直接调控α-SMA的表达,促进肝癌侵袭转移。UC001kfo的结合蛋白(UC001kfo-pro)是UC001kfo发挥调控功能的关键分子。本课题应用体外转录UC001kfo,应用RNA pulldown、质谱分析、RNA免疫沉淀分析、RT-PCR和western blot,鉴定和验证UC001kfo-pro;利用基因过表达和干扰技术研究UC001kfo通过UC001kfo-pro调控α-SMA的表达;研究UC001kfo-pro对UC001kfo发挥促进肝癌侵袭转移的意义。本课题阐明UC001kfo在肝癌侵袭中对α-SMA的调控机制,进一步揭示肝癌侵袭转移的机制,为肝癌治疗提供新靶点。
英文摘要
The invasion and matastasis of hepatocellular carcinoma (HCC) is the primary cause for the patients’ poor prognosis. The alpha smooth muscle actin (α-SMA) plays an important role in the invasion and metastasis of cancer cells, which is regulated by a variety of signaling pathways and proteins. In our initial experiments, a new long noncoding RNA (lncRNA) UC001kfo was found to promote the invasion and metastasis of HCC. lncRNA is a noncoding RNA with important gene regulations. Moreover, our previous and preliminary results demonstrated that the gene of α-SMA is being the target gene of UC001kfo, and UC001kfo promotes the invasion and metastasis of HCC through α-SMA. UC001kfo binding protein (UC001kfo-pro) is a key protein molecule of UC001kfo regulation function. The current project studies how UC001kfo regulates and controls α-SMA and promotes the invasion and metastasis of HCC. By techniques such as in vitro transcription of UC001kfo, the RNA pull down experiment, mass spectrographic analysis, RNA immunoprecitation (RIP), RT-PCR, western blot, UC001kfo-pro is identified and verified. By the cell model, gene expression and interference technique was used to study of UC001kfo regulating α –SMA through UC001kfo-pro. By cell and animal models, the important role of UC001kfo-pro for UC001kfo’s gene regulation in invasion and metastasis of HCC. This project illustrates UC001kfo’ mechanisms in the control and regulation of α –SMA in the invasion of HCC so as to further provides effective target points for the treatment of HCC.
侵袭转移是肝癌患者预后极差的主要原因。肝癌侵袭转移中,发挥关键作用的α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)受多种信号通路的调控,对其干预效果差。我们前期实验中发现一个新的长链非编码RNA UC001kfo通过调控α-SMA的表达,促进肝癌侵袭转移。因而,本研究将以UC001kfo通过α-SMA调控肝癌转移侵袭的作用机制为主要目标,为以α-SMA为核心的肝癌转移侵袭调控通路的机制研究奠定坚实的基础。我们使用信息学预测核转录因子Sp1可以与α-SMA启动子结合,我们通过荧光素酶报告基因以及CHIP-PCR实验进行了验证和证实。UC001kfo通过与Sp1的泛素化位点结合从而抑制其泛素化。Sp1在多种肿瘤组织中呈高表达,Sp1通过调控下游基因的转录表达,参与调节肿瘤的生长、侵袭及血管生成等多种生物学行为。一条新的肝癌调控通路UC001kfo/Sp1/a-SMA呈现出来,即肝癌组织及细胞中过量的UC001kfo通过上调Sp1的表达,Sp1含量的增加直接上调受其调控的下游的基因a-SMA的转录,最终肝癌转移侵袭增强。我们对通路特异性及作用主导性做了分析,表明UC001kfo/Sp1/a-SMA主导了UC001kfo促进肝癌侵袭转移的过程。本研就的重要意义在于,我们发现并明确了一条新的肝癌侵袭转移调控机制UC001kfo/Sp1/a-SMA,这为LncRNA在肝癌肝癌侵袭转移中的作用机制的完善,以及以UC001kfo为靶点的肝癌基因治疗的前瞻性研究提供了理论基础。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
DOI:--
发表时间:2016
期刊:中华实验外科杂志
影响因子:--
作者:潘延凤
通讯作者:潘延凤
Differential expression of genes in HepG2 cells caused by UC001kfo RNAi as shown by RNA-seq
RNA-seq显示UC001kfo RNAi引起的HepG2细胞中基因的差异表达
DOI:10.1007/s11596-017-1765-1
发表时间:2017-08
期刊:J Huazhong Univ Sci Technolog Med Sci.
影响因子:--
作者:Pan YF
通讯作者:Pan YF
Long non-coding RNA UC001kfo promotes hepatocellular carcinoma proliferation and metastasis by targeting a-SMA
长链非编码RNA UC001kfo通过靶向a-SMA促进肝细胞癌增殖和转移
DOI:--
发表时间:2017
期刊:Biomedicine & Pharmacotherapy
影响因子:7.5
作者:Yanfeng Pan
通讯作者:Yanfeng Pan
DOI:--
发表时间:2016
期刊:中华实验外科杂志
影响因子:--
作者:潘延凤
通讯作者:潘延凤
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