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GATA转录因子Dal80p对黄酒加工酿酒酵母代谢形成氨基甲酸乙酯的调控机制研究
结题报告
批准号:
31871904
项目类别:
面上项目
资助金额:
60.0 万元
负责人:
陈启和
依托单位:
学科分类:
C2010.食品安全与品质控制
结题年份:
2022
批准年份:
2018
项目状态:
已结题
项目参与者:
何国庆、旷慧、牛永武、周万怡、胡竞进、吴嘉南、舒琴
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中文摘要
黄酒中存在的氨基甲酸乙酯是影响其品质与安全的重要难题,也是制约传统黄酒酿造加工产业升级与品质提升的关键。在黄酒酿造体系中低氮生境如氮代谢抑制效应(NCR)是导致黄酒酿造酵母细胞代谢生成EC前体物的核心科学难题。鉴于此,本申请项目在原有研究基础上,借助基因敲除、过表达手段构建Dal80p工程菌株;借助代谢产物定量和RT-PCR方法鉴定Dal80p对精氨酸代谢调控的物质与酶学差异;采用转录组学探索Dal80p调控精氨酸代谢的分子机制,鉴定出其调控的关键差异基因;借助分子互作手段阐明DAL80P与关键差异基因的互作机理;借助酿造学评价方法,研究其模拟体系和实际加工体系中对酿酒酵母细胞代谢生成EC的抑制作用。本项目研究结果不仅为解析我国传统黄酒酿造营养胁迫环境与EC 形成及其调控提供理论基础和科学依据,达到有效抑制EC 的形成目的,也将为调控我国其他酿造食品中代谢性污染物形成的研究提供借鉴依据。
英文摘要
Ethyl carbamate (EC) is an important metabolic pollutant presented in Chinese yellow rice wine affecting its quality and safty, which restricts the quality improvement and industrial upgrading of traditional Chinese yellow rice wine processing products. In Chinese yellow rice wine brewing system, low nitrogen habitat such as nitrogen catabolite repression (NCR) is a key scientific problem which leads to the formation of EC precursors by yeast metabolism. Therefore, based on the preliminary studies, this project constructs a Dal80p engineered yeast strain by means of gene knockout and overexpression; identifies substances and enzymatic differences of arginine metabolism during the regulation of Dal80p by means of metabolites quantitative and RT-PCR; explores molecular mechanism of Dal80p on arginine metabolism by means of transcriptomics and identifies its key differentially regulated genes; clarifies the interaction between Dal80p and key differentially expressed genes by means of molecular interaction; studies its inhibition of EC produced by Saccharomyces cerevisiae metabolism in the simulated system and actual processing system by means of brewing experiment. The results of this project not only provide a theoretical basis and scientific basis for the analysis of the nutritional stress environment, EC formation and its regulation during traditional Chinese yellow rice wine brewing to achieve the purpose of effectively inhibiting the formation of EC, but also provide reference for researches on regulating the formation of metabolic pollutants in other fermented foods in China.
氨基甲酸乙酯是发酵食品特别是发酵饮品中分布最广的2A级致癌物质之一,已有研究表明其形成的主要原因是酿酒酵母氮代谢阻遏效应引起的氮源选择性和不充分利用。因此,深入理解酿酒酵母细胞的氮代谢调控机制,对发酵菌株进行代谢工程靶向改造是解决发酵饮品中氨基甲酸乙酯形成最有效的途径。课题组前期研究表明,Dal80是酿酒酵母细胞氮代谢阻遏效应负向转录调控因子之一,但其在氮代谢过程中功能作用还不甚了解,Dal80p的功能和可能的作用机理目前一直尚不清晰。本项目以黄酒发酵所处的氮营养分解代谢胁迫(NCR)环境为背景,在原有研究基础上,借助基因敲除、过表达手段构建Dal80p工程菌株,完成了3株酵母菌的代谢产物定量和RT-PCR方法鉴定Dal80p对精氨酸代谢调控的物质与酶学差异,随后采用转录组学探索Dal80p调控精氨酸代谢的分子机制,通过生信分析鉴定出其调控的关键差异基因和主要调控途径,并首次借助Chip-Seq手段阐明DAL80P与关键差异基因的互作机理,挖掘出其调控精氨酸代谢的具体靶标和可能途径,最后采用酿造学研究手段,阐明DAL80改造菌株在模拟体系和实际酿造体系中对酿酒酵母细胞代谢生成EC的抑制作用及其实际应用价值,结果发现DAL80能大幅度降低胞外尿素的生成,从而实现EC含量降低到对照组的一半,但对黄酒酿造的整体产品品质没有带来负面影响。项目项目研究结果为解析我国传统黄酒酿造营养胁迫环境与EC 形成及其调控提供理论基础和科学依据,也将为调控我国其他酿造食品中代谢性污染物的靶向调控及高品质制造提供借鉴依据。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
Deletion of Atg22 gene contributes to reduce programmed cell death induced by acetic acid stress in Saccharomyces cerevisiae
Atg22 基因的缺失有助于减少酿酒酵母乙酸应激诱导的程序性细胞死亡
DOI:10.1186/s13068-019-1638-x
发表时间:2019-12
期刊:Biotechnology for Biofuels
影响因子:6.3
作者:Hu Jingjin;Dong Yachen;Wang Wei;Zhang Wei;Lou Hanghang;Chen Qihe
通讯作者:Chen Qihe
DOI:10.1111/1541-4337.13038
发表时间:2022
期刊:Comprehensive Reviews in Food Science and Food Safety
影响因子:--
作者:Jiaqi Luo;Siyu Liu;Hongyun Lu;Qihe Chen;Ying Shi
通讯作者:Ying Shi
Mitochondria-Mediated Programmed Cell Death in Saccharomyces Cerevisiae Induced by Betulinic Acid is Accelerated by the Deletion of PEP4 Gene
PEP4 基因的缺失加速了桦木酸诱导的酿酒酵母中线粒体介导的程序性细胞死亡
DOI:10.3390/microorganisms7110538
发表时间:2019-11
期刊:Microorganisms
影响因子:4.5
作者:Lu Hongyun;Shu Qin;Lou Hanghang;Chen Qihe
通讯作者:Chen Qihe
DOI:10.1016/j.foodchem.2020.126554
发表时间:2020-03
期刊:Food chemistry
影响因子:8.8
作者:Wanyi Zhou;Jingjin Hu;Xinglin Zhang;Qihe Chen
通讯作者:Wanyi Zhou;Jingjin Hu;Xinglin Zhang;Qihe Chen
DOI:--
发表时间:2022
期刊:中国食品学报
影响因子:--
作者:娄行行;周万怡;芦红云;陈启和
通讯作者:陈启和
黄酒酿造中酿酒酵母精氨酸代谢池的靶向调控机理及对氨基甲酸乙酯消减应用基础
  • 批准号:
    LZ23C200004
  • 项目类别:
    省市级项目
  • 资助金额:
    0.0万元
  • 批准年份:
    2023
  • 负责人:
    陈启和
  • 依托单位:
基于NCR效应黄酒酿造鸟氨酸氨甲酰基转移酶对氨基甲酸乙酯生成的作用及分子调控机制
  • 批准号:
    31371825
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    77.0万元
  • 批准年份:
    2013
  • 负责人:
    陈启和
  • 依托单位:
传统黄酒发酵中氨基甲酸乙酯产生的酶学基础及调控研究
  • 批准号:
    31171734
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    60.0万元
  • 批准年份:
    2011
  • 负责人:
    陈启和
  • 依托单位:
天麻素微生物细胞生物合成的关键酶基因pUDP-GlcT鉴定及其功能研究
  • 批准号:
    20806069
  • 项目类别:
    青年科学基金项目
  • 资助金额:
    18.0万元
  • 批准年份:
    2008
  • 负责人:
    陈启和
  • 依托单位:
国内基金
海外基金