果实是开花植物的重要器官，成熟的果实是人类膳食结构的重要的组成。因此了解果实成熟机理，揭示果实成熟调控机制网络，具有重要意义。本项目在全基因组水平筛选与番茄成熟相关的RNA结合蛋白，利用CRISPR/Cas9敲除关键RNA结合蛋白基因，解析关键RNA结合蛋白的生物学功能，通过转录组测序和RIP-seq技术鉴定RNA结合蛋白直接调控靶RNA，最终阐明RNA结合蛋白调控果实成熟的分子机制。主要结果如下：.(1)在番茄基因组中，通过生物信息学手段筛选到43个与番茄成熟相关的RNA结合蛋白基因，再结合基因功能快速鉴定技术VIGS，我们鉴定出3个与果实成熟相关的关键 RBP。对其中的RBP4进行基因进化分析，发现RBP4与拟南芥中的RNA编辑因子ORRM4高度同源，因此将RBP4命名为SlORRM4。对SlORRM4进行表达模式分析发现其在果实中高量表达；对SlORRM4进行亚细胞定位分析，确定其定位于线粒体。.（2）运用CRISPR/Cas9基因编辑技术获得SlORRM4功能缺失突变体，发现slorrm4突变体的果实成熟进程相比野生型大幅度延迟，并伴随着呼吸峰和乙烯峰的延迟和降低，表明SlORRM4是番茄果实成熟的正调控因子。.（3）RNA-seq分析发现slorrm4突变体中果实成熟和线粒体功能相关的基因表达发生了显著的变化。通过RNA编辑检测和RIP-qPCR试验，表明SlORRM4影响了较多的线粒体RNA编辑效率，并直接与被编辑的靶向RNA结合。观察slorrm4突变体果实的线粒体发现其形态异常，嵴不能正常形成。蛋白免疫杂交发现，slorrm4突变体线粒体呼吸链复合物的关键蛋白表达水平降低，线粒体呼吸链功能受损。这些结果表明SlORRM4调控线粒体RNA编辑影响线粒体功能，进而影响果实成熟过程。.本项目对RNA结合蛋白SlORRM4调控番茄果实成熟分子机理的解析，丰富了果实成熟调控网络，为果实品质保持和耐贮性改良提供理论基础。