miR-33和miR-199a在黑色素瘤转移中的作用及机制探讨

批准号:
81071645
项目类别:
面上项目
资助金额:
35.0 万元
负责人:
周建大
依托单位:
学科分类:
H1801.肿瘤病因
结题年份:
2013
批准年份:
2010
项目状态:
已结题
项目参与者:
谢慧清、黄程辉、尹朝奇、刘海航、李雄、王少华、李文波
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中文摘要
在前期皮肤黑色素瘤临床研究中发现miR-33和miR-199a与黑色素瘤的高转移显著正相关的基础上,本课题以miR-33和miR-199a基因过表达或表达抑制的B16F10细胞株和裸鼠种植瘤及肺转移瘤为模型,在细胞和动物水平验证miR-33和miR-199a对黑色素瘤转移和血管生成生物学特性的影响,然后以基因芯片技术探讨miR-33和miR-199a对肿瘤转移基因表达的调控,筛选出受miR-33和miR-199a调控的下游转移基因;并运用生物信息学和荧光素酶报告基因技术从转录水平探讨miR-33和miR-199a对转移基因表达的调控机制;最后在临床标本和B16F10细胞株中验证miR-33和miR-199a作用的下游基因对黑色素瘤转移的调控作用,为临床诊断和治疗提供理论指导,形成转化医学的研究模式。
英文摘要
1、设计了let-7b,miR-33和miR-199a的过表达质粒和inhibitor干扰片段,运用基因转染技术将对应组别的外源基因导入B16F10或A375细胞中,成功完成基因转染,并通过Real-time PCR、Western-blot、MTT法及流式细胞术分别从RNA水平、蛋白水平和细胞水平三方面检测let-7b,miR-33和miR-199a基因对黑色素瘤生长与增殖及凋亡的影响,证实了let-7b,miR-33和miR-199a的表达与黑色素瘤生长与侵袭存在显著相关性,负调控黑色素瘤细胞的生长和侵袭,为黑色素瘤的关键miRNA;. 2、进一步采用美国SABiosciences公司的鼠源肿瘤转移PCR芯片( PAMM-028A ),在已知的84个转移相关基因中筛选了受let-7b和miR-199a调控的相关基因,其中发现受到let-7b正向调控的基因包括有Kiss1、Apc、Cdh6、Ctnna1、Cd44、Hgf、Cdh1、Hras1;可能受到负向调控的基因包括有:Flt4、Kiss1r、Hpse、Igf1、Il1b等。在 miR-199a调控的黑色素瘤转移相关基因中,可能正向调控的基因有:Cd44、Cdh1、Ctbp1、Etv4、Fxyd5、Rpsa、Mycl1、Myc、Nme2、Cd82、Rb1、Tcf20、Hprt1、Actb1;可能负向调控黑色素瘤B16F10细胞生长、侵袭的基因有:Ctsk、Csf1、Ela2、P2ry5、Hras1、Ctsk、Itga7、Tnfsf10。验证发现Myc基因受miR-199a负调控,Tnfsf10基因受miR-199a正调控。.3、稳定转染过表达miR-33a的A375细胞株的构建及裸鼠肿瘤模型的建立。.4、黑色素瘤及黑色素痣临床标本的收集及检测。
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Let-7b and microRNA-199a inhibit the proliferation of B16F10 melanoma cells
Let-7b和microRNA-199a抑制B16F10黑色素瘤细胞的增殖
DOI:10.3892/ol.2012.878
发表时间:2012-11-01
期刊:ONCOLOGY LETTERS
影响因子:2.9
作者:Xu, Dan;Tan, Jianxiang;Zhou, Jianda
通讯作者:Zhou, Jianda
DOI:--
发表时间:2013
期刊:肿瘤研究与临床
影响因子:--
作者:李文波;周建大;谢慧清
通讯作者:谢慧清
DOI:--
发表时间:2013
期刊:中南大学学报(医学版)
影响因子:--
作者:曹科;刘睿;周建大;罗成群
通讯作者:罗成群
DOI:--
发表时间:2011
期刊:中国医师杂志
影响因子:--
作者:罗成群;谭建湘;谢慧清;蒋碧梅;周鸣;刘海航;李明;张彦文;徐丹
通讯作者:徐丹
DOI:--
发表时间:2012
期刊:中国医师杂志
影响因子:--
作者:谢慧清;李明;李万猛;周鸣;罗成群;尹朝奇;陈铁夫;李萍;陈佳
通讯作者:陈佳
circ0008157海绵吸附miR-197-5p和miR-335-3p抑制黑色素瘤血管生成的研究
- 批准号:81872219
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:55.0万元
- 批准年份:2018
- 负责人:周建大
- 依托单位:
LINC00657介导内质网应激反应活化参与黑色素瘤侵袭转移的功能及机制研究
- 批准号:81572689
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:55.0万元
- 批准年份:2015
- 负责人:周建大
- 依托单位:
TARDBP和HIF-1α在神经酰胺调控黑色素瘤糖酵解抑制增殖转移中的作用机制研究
- 批准号:81372140
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:75.0万元
- 批准年份:2013
- 负责人:周建大
- 依托单位:
内皮抑素基因在黑色素瘤中的功能和机制研究
- 批准号:30600366
- 项目类别:青年科学基金项目
- 资助金额:8.0万元
- 批准年份:2006
- 负责人:周建大
- 依托单位:
国内基金
海外基金
