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柞蚕神经肽PBAN的受体鉴定及其作用的信号转导分析
结题报告
批准号:
31072091
项目类别:
面上项目
资助金额:
34.0 万元
负责人:
魏兆军
依托单位:
学科分类:
C1709.养蚕学
结题年份:
2013
批准年份:
2010
项目状态:
已结题
项目参与者:
李玉萍、朱绪伟、田科巍、汪爱民、邱娜莎、潘文娟
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中文摘要
昆虫性信息素合成激活肽(PBAN) 的主要功能是调节雌蛾性信息素的合成和释放,控制昆虫的交配繁衍继代,但其调控性信息素合成的信号通路存在2种不同观点。本项目拟开展柞蚕神经肽PBAN受体鉴定及其作用的信号转导研究。克隆柞蚕PBAN受体基因,构建质粒,转染合适的细胞株后鉴定PBAN受体。制备PBAN模拟肽(mimetic peptides),鉴定其与受体的作用及生理活性。解剖性腺与PBAN体外培养,利用钙离子及其通道阻断剂和载体、cAMP、毛喉素等调控性信息素的合成,明确柞蚕PBAN作用信号的第2信使。利用Solexa 高通量测序的方法测定不同组织转录组,明确性腺特异表达基因。利用RNAi或其他方法鉴定PBAN调控性信息素合成的关键基因。本研究结果有助于深入了解PBAN 调节性信息素合成的精确机制,为有效地控制害虫和调节益虫饲养建立基础;也为研究其他昆虫神经肽基因的受体及信号转导建立基础。
英文摘要
昆虫性信息素合成激活肽(PBAN) 的主要功能是调节雌蛾性信息素的合成和释放,控制昆虫的交配繁衍继代。本项目克隆了柞蚕神经肽PBAN受体基因(Anp-PBANR),Anp-PBANR基因的ORF为1038bp,编码345个氨基酸,ORF编码的蛋白具有G蛋白偶联受体典型特征,具有7个跨膜蛋白结构域(TM)。把Anp-PBANR的ORF插入到PcDNA5-FRT载体中,转染细胞株后与PBAN进行结合反应,Ca2+反应明显,剂量效应为EC50=0.003uM。合成PBAN的C端9个氨基酸(RTRYFSPRLa,命名为AP1),AP1与Anp-PBAN受体的结合反应与PBAN几乎相当,再分别去除F、S、P、R、L氨基酸,结合反应后证明FSPRL关键氨基酸对与PBAN受体的结合活性影响顺序为去酰胺化>L>R>F>P>S。采取不同的修饰方法进一步合成31种模拟肽,[Aib-Aib-Aib-Aib]FTPRLa的结合活性最高,达到AP1的65.59%,结合活性达到AP1的50%以上的还有5种。建立柞蚕性腺体外培养体系,PBAN培养后可以显著提升柞蚕性信息素的主要成分反-6,顺-11-十六碳二烯醋酸酯 (E-6,Z-11-I6:Ac)的合成。Ca2+载体A23187和离子霉素能够显著提升信息素的合成,而cAMP几乎没有影响,说明柞蚕PBAN调控信息素的合成是通过Ca2+信号转导通路。在转录组分析基础上,筛选出17个与性信息素合成与代谢相关的基因;其中Acetyl CoA Carboxylase等8个基因主要在性腺中特异高表达。根据转录组结果和家蚕和棉铃虫性信息素通路的报道,预测了柞蚕性信息素合成的通路。RNAi研究结果显示抑制柞蚕PBAN受体、去饱和酶、脂肪酶和酰基辅酶A结合蛋白后,柞蚕信息素合成显著降低,表明这4种基因参与调控柞蚕信息素的合成。上述研究成果,为我们进一步研究其它昆虫其它神经肽基因的受体建立了基础,为我们利用G蛋白偶联受体筛选活性模拟肽、开发新型昆虫生长调节剂建立了平台。本项目已经发表论文5篇,其中SCI期刊2篇;目前还有2篇SCI文章待发表。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
DOI:--
发表时间:2012
期刊:合肥工业大学学报(自然科学版)
影响因子:--
作者:方婷婷;章建国;魏兆军
通讯作者:魏兆军
DOI:10.3390/genes4020264
发表时间:2013-05-30
期刊:Genes
影响因子:3.5
作者:Qi HS;Liu SM;Li S;Wei ZJ
通讯作者:Wei ZJ
Characterization of a Gene Encoding KK-42-Binding Protein in Antheraea pernyi (Lepidoptera: Saturniidae)
柞蚕(鳞翅目:土星科)编码 KK-42 结合蛋白的基因的表征
DOI:10.1603/an12009
发表时间:2012-09-01
期刊:ANNALS OF THE ENTOMOLOGICAL SOCIETY OF AMERICA
影响因子:2.3
作者:Liu, Yan-Qun;Chen, Miao-Miao;Jiang, De-Fu
通讯作者:Jiang, De-Fu
DOI:--
发表时间:2012
期刊:合肥工业大学学报(自然科学版)
影响因子:--
作者:邱娜莎;刘畅;严雅静;魏兆军
通讯作者:魏兆军
DOI:10.3390/ijms13022354
发表时间:2012
期刊:International journal of molecular sciences
影响因子:5.6
作者:Pan WJ;Liao AM;Zhang JG;Dong Z;Wei ZJ
通讯作者:Wei ZJ
气体信号分子硫化氢调控家蚕生长发育的机理研究
  • 批准号:
    31772680
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    60.0万元
  • 批准年份:
    2017
  • 负责人:
    魏兆军
  • 依托单位:
棉铃虫神经肽促咽侧体素GPCR的鉴定及新型配体筛选
  • 批准号:
    31272111
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    80.0万元
  • 批准年份:
    2012
  • 负责人:
    魏兆军
  • 依托单位:
家蚕神经肽促前胸腺激素基因启动子的结构及转录调控分析
  • 批准号:
    30500374
  • 项目类别:
    青年科学基金项目
  • 资助金额:
    23.0万元
  • 批准年份:
    2005
  • 负责人:
    魏兆军
  • 依托单位:
国内基金
海外基金