以杯状细胞数量增多为特征的“气道上皮重塑”，是哮喘气道黏液高分泌症状形成的物质基础。既往资料及课题组前期研究发现：①哮喘小鼠模型具有通过凋亡途径减少新增杯状细胞的自身调节能力；②哮喘患者杯状细胞的促凋亡基因Bax表达水平显著低于其他人群；③细胞膜高表达的特异性钙激活Cl-通道（Calcium activated chloride channel, CLCA）是识别哮喘新生气道杯状细胞的标识，也在调节黏蛋白MUC5AC合成方面扮演着重要角色；④但目前CLCA尚无特异性阻断剂。基于此，本项目旨在探讨采用特异性抗体干预的方式识别和阻断CLCA功能，从而定向诱导哮喘新增气道杯状细胞凋亡的干预策略，并探讨分子机制。最终为哮喘气道上皮重塑的病理变化、气道黏液高分泌的临床症状的防治，提供新的治疗思路，丰富气道重塑的理论。我们主要的实验结果有：（1）全基因合成小鼠mCLCA3的全长、N端及C端序列，构建原核表达载体，表达mCLCA3的全长、N端及C端重组蛋白。（2）分别采用mCLCA3全长、N端及C端蛋白免疫BALB/c 小鼠，制备出针对mCLCA3全长、N端以及C端的单克隆抗体。（3）成功构建了稳定转染mCLCA3全长的NCI-H292细胞系，转染效率达到50%以上，采用Western blot证实了转染细胞中mCLCA3相关蛋白的表达。(4)体外干预研究结果表明，针对mCLCA3全长及N端的单克隆抗体均能够抑制杯状细胞模型NCI-H292/mCLCA3的增殖；同时，发现该两种干预组细胞周期中G1期的比例明显上升，S期则下降，而针对C端的单克隆抗体则没有此功能，说明mCLCA3蛋白的活性端为N端肽段。此外，采用mCLCA3-N端单克隆抗体在抑制黏蛋白MUC5AC合成的同时，能够显著促进转染细胞凋亡。（5）在摸清哮喘小鼠模型杯状细胞产生及凋亡的规律基础上，采用mCLCA3-N端单克隆抗体对哮喘小鼠模型进行在体干预研究。结果表明，该单抗能够诱导气道上皮杯状细胞凋亡的产生，这是通过抑制Bcl-2的表达同时上调Bax的表达实现的。（6）进一步的机制研究结果表明，mCLCA3-N端单克隆抗体促进杯状细胞凋亡是通过Caspse非依赖的途径进行的。本研究的首次发现及结论，将为进一步阐明CLCA在哮喘发病中的角色及筛选防治靶位提供了理论依据。