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树突状细胞和调节性T细胞共同介导的乳酸菌抗结肠炎作用免疫机制研究
结题报告
批准号:
81170358
项目类别:
面上项目
资助金额:
14.0 万元
负责人:
王春凤
依托单位:
学科分类:
H0302.消化系统免疫相关疾病
结题年份:
2012
批准年份:
2011
项目状态:
已结题
项目参与者:
胡静涛、杨文涛、杜金粉、孟菲、石春卫、赵葛、石少华、王怡君、郭晓敏
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中文摘要
乳酸菌作为益生菌,在防治炎症性肠病(IBD)和保障人类健康方面具有重要的生理作用和潜在应用价值,但其如何调解机体免疫系统的机制尚不明确。鉴于此,本研究应用已经筛选的具有抗炎活性的乳酸菌干预正常小鼠,采用免疫磁珠法分离肠系膜淋巴结中CD11c+树突状细胞应用流式细胞术、荧光定量PCR等方法研究乳酸菌诱导DCs亚群的分化与发育以及分化的DCs亚群对Tregs发育的影响;应用乳酸菌干预三硝基苯磺酸诱导的小鼠结肠炎模型和CD4+CD45RBhighT细胞过继性转入SCID小鼠诱导的慢性结肠炎模型,采用流式细胞术、免疫荧光技术等研究Tregs在小鼠结肠炎模型中的免疫调节作用,阐明乳酸菌调节免疫系统发挥抗炎效应的分子作用机制,为进一步开发乳酸菌作为免疫调节剂预防IBD奠定理论基础。
英文摘要
本研究获得具有抗炎活性的混合乳酸菌Lactobacillus acidophilus ATCC 4356 +Lactobacillus rhamnosus GG ATCC 53103+Lactobacillus plantarum A,其中,ATCC4356、ATCC 53103购自美国模式培养物研究所,L.p A由本实验室从市售酸奶中分离得到,经过16s rDNA技术进行鉴定后,用于实验。体外筛选通过检测MLN与乳酸菌共培养后Foxp3、IL-10、IL-12等的表达,进行筛选;体内筛选通过检测不同组合的乳酸菌干预小鼠后MLN中CD4+CD25+Foxp3+Treg、IL-10、IL-12的表达进行筛选。另一方面,将筛选出的混合乳酸菌干预小鼠21d后,检测小鼠MLN和脾脏中CD11c+CD11b+CD8α+DC、CD11c+B220+CD8α+DC、CD80/CD86、CD40、MHC-II等技术指标,明确乳酸菌对体内树突状细胞亚群的分化、发育的作用;应用MACS分选乳酸菌作用后小鼠MLN中的DC,与MACS分选出的正常Balb/C小鼠的CD4+T细胞共培养,检测Th1型(IFN-γ)、Th2型(IL-4)、Th17(IL-17)型细胞因子,评价乳酸菌诱导的DC对Th细胞的极化作用,评价乳酸菌诱导的DC使得Th细胞向哪个方向极化。最后,将筛选出的混合乳酸菌干预小鼠21d后,检测CD4+CD25+Foxp3+Treg及相关因子,再用柠檬酸杆菌(Citrobacter rodentium ATCC 51459)干预乳酸菌作用后的小鼠,并检测CD4+CD25+Foxp3+Treg,IL-17、IFN-γ、TNF等相关细胞因子,截取小鼠远端结肠进行组织病理学检测,从分子水平和细胞水平阐明Treg对宿主免疫系统产生抗炎作用的机制。
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
吉林省畜禽重要疫病病原与宿主肠道微生态互作及抗感染免疫机制研究
  • 批准号:
    --
  • 项目类别:
    --
  • 资助金额:
    266万元
  • 批准年份:
    2021
  • 负责人:
    王春凤
  • 依托单位:
非洲猪瘟病毒阻断技术与生物防控基础研究
  • 批准号:
    31941018
  • 项目类别:
    专项基金项目
  • 资助金额:
    100万元
  • 批准年份:
    2019
  • 负责人:
    王春凤
  • 依托单位:
乳酸菌在不同种属动物肠相关淋巴组织B细胞分化发育中的作用及分子免疫机制研究
  • 批准号:
    31672528
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    62.0万元
  • 批准年份:
    2016
  • 负责人:
    王春凤
  • 依托单位:
树突状细胞(Dendritic cells,DCs)介导的黏膜免疫对猪轮状病毒(PRV)感染的分子作用机制研究
  • 批准号:
    31272541
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    82.0万元
  • 批准年份:
    2012
  • 负责人:
    王春凤
  • 依托单位:
乳酸菌S层蛋白表面展示系统的构建和“安全级”抗禽流感基因工程乳酸菌的研究
  • 批准号:
    30870116
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    30.0万元
  • 批准年份:
    2008
  • 负责人:
    王春凤
  • 依托单位:
乳酸菌介导黏膜免疫传导途径和可能作用机制的研究
  • 批准号:
    30671573
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    32.0万元
  • 批准年份:
    2006
  • 负责人:
    王春凤
  • 依托单位:
基因功能乳酸菌回归鸡肠道后定位演替及其生物学效应研究
  • 批准号:
    30200199
  • 项目类别:
    青年科学基金项目
  • 资助金额:
    22.0万元
  • 批准年份:
    2002
  • 负责人:
    王春凤
  • 依托单位:
国内基金
海外基金