基于毛细管电泳柱端微反应器筛选HIV gp41融合抑制剂的研究
结题报告
批准号:
30901826
项目类别:
青年科学基金项目
资助金额:
20.0 万元
负责人:
刘利红
依托单位:
学科分类:
H3506.抗感染药物药理
结题年份:
2012
批准年份:
2009
项目状态:
已结题
项目参与者:
吕琳、陈金香、张群、杨洁、谭穗懿
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中文摘要
艾滋病是由人类免疫缺陷病毒(HIV)引起的传染性疾病。HIV gp41是HIV的跨膜糖蛋白,作为开发抗HIV药物的一个新靶点,可被用于筛选阻止其六股α-螺旋束结构形成的抑制剂。本课题根据我们在毛细管电泳分离中草药活性组分,药物活性分子与人血清白蛋白相互作用研究领域积累的经验,以毛细管电泳多肽柱端微反应器为手段,建立抑制HIV gp41六股α-螺旋束结构形成的药物先导化合物的高通量筛选新方法,计算药物分子与靶分子间的结合位点数与结合常数,通过对药物活性分子与gp41结合作用的动力学考察,推测两者发生结合作用的主要作用力类型,计算得两者之间相互作用的焓变和熵变。采用参数来表征给体与受体间的结合情况,对结合常数大的化合物,确认其阻止六螺旋束结构形成的活性,并进行细胞膜透过性实验,进一步确认其为病毒融合抑制剂。本项目的开展对HIV的防治有重要的社会和经济意义。
英文摘要
艾滋病是由人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus, HIV)感染引起的严重威胁人类健康的传染性疾病。HIV 的包膜蛋白gp41在病毒进入靶细胞的早期环节起关键作用。在HIV感染过程中,诱导gp41蛋白的构型改变,可以终止感染进程。因此,gp41被当做开发HIV进入抑制剂的一个重要靶点。N36和C34是从HIV-gp41的NHR和CRH区衍生出来的多肽,二者在体外能形成类似gp41 NHR和CRH结合的螺旋结构。因此,抗gp41六螺旋束核心结构的药物活性可以通过它们抑制N36和C34结合的作用来测定。高通量药物筛选是当前新药发现的手段之一,所以建立适用于普通实验室筛选HIV进入抑制剂高通量药物筛选的方法,对于开发抗HIV新药显得尤为重要。毛细管电泳是一种高效、快速、微量的分离分析技术,在生物分析领域应用广泛。本项目将混合胶束作为分离介质引入毛细管电泳,且建立了胶束解聚富集法,并采用间接紫外分析法对无紫外吸收的化合物进行了分离测定,以上研究工作为在微量、超微量组分及无紫外吸收的药物活性组分中寻求新的抗HIV gp41抑制剂打下坚实基础。在项目研究中构建了两种微反应器,一种是将N多肽通过层层自组装方式在毛细管柱端构建“聚电解质-酶的微反应器”,另外一种是利用柱端区带灌注N36作为微反应器,通过比较发现后者稳定性和重现性更优。利用微反应器研究药物组分与N36之间的相互作用,建立了以有效组分、有效电泳淌度及峰高度的变化为判断依据的结构筛选模型。该模型旨在用于筛选具有潜在抗HIV活性的化合物。在对中草药有效成分的分析研究中发现,一些中草药的多糖、皂苷、生物碱、黄酮以及蛋白质类物质可以抑制HIV复制,具有很好的抗HIV病毒活性。本项目共筛选了176种中药提取物,经毛细管电泳粗筛获得14种阳性提取物。后通过酶联免疫吸附分析(ELISA)和天然聚丙烯酰胺凝胶电泳(N-PAGE)及假病毒和细胞毒性实验分析确定,目前发现4种中药提取液在ELISA法中可见化合物有较好的抑制作用。在抗HIV R5 Env假病毒感染活性的检测中,发现LX-176-5提取物有抑制假病毒感染的活性,且为剂量依赖。该提取物有望筛选到抗HIV gp41亚基六螺旋束的形成的药物前体化合物。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
Determination of capsaicin and dihydrocapsaicin in Capsicum anuum and related products by capillary electrophoresis with a mixed surfactant system
混合表面活性剂体系毛细管电泳法测定辣椒及相关产品中的辣椒素和二氢辣椒素
DOI:10.1016/j.foodchem.2009.08.045
发表时间:2010-04-01
期刊:FOOD CHEMISTRY
影响因子:8.8
作者:Liu, Lihong;Chen, Xingguo;Tan, Suiyi
通讯作者:Tan, Suiyi
DOI:10.1016/j.chroma.2009.11.038
发表时间:2010
期刊:Journal of chromatography. A
影响因子:--
作者:Lihong Liu;Xinxia Deng;Xingguo Chen
通讯作者:Lihong Liu;Xinxia Deng;Xingguo Chen
DOI:10.1002/elps.201200021
发表时间:2012-07-01
期刊:ELECTROPHORESIS
影响因子:2.9
作者:Liu, Lihong;You, Wenwei;Jia, Zhimin
通讯作者:Jia, Zhimin
Ap-Exo III 联合模式识别构建降尿酸药 物筛选新方法的研究
  • 批准号:
    --
  • 项目类别:
    省市级项目
  • 资助金额:
    10.0万元
  • 批准年份:
    2025
  • 负责人:
    刘利红
  • 依托单位:
基于DNaseI-Ap-GO联合多靶标平行在线富集微流控芯片的原发性肝癌早期诊断新方法研究
  • 批准号:
    --
  • 项目类别:
    省市级项目
  • 资助金额:
    10.0万元
  • 批准年份:
    2021
  • 负责人:
    刘利红
  • 依托单位:
基于集成微流控芯片的血小板功能检测新方法研究
  • 批准号:
    81973282
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    55.0万元
  • 批准年份:
    2019
  • 负责人:
    刘利红
  • 依托单位:
基于微流控芯片在线检测全血中内毒素的新方法研究
  • 批准号:
    81470161
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    30.0万元
  • 批准年份:
    2014
  • 负责人:
    刘利红
  • 依托单位:
国内基金
海外基金