基于微流控芯片在线检测全血中内毒素的新方法研究

批准号:
81470161
项目类别:
面上项目
资助金额:
30.0 万元
负责人:
刘利红
依托单位:
学科分类:
H3410.药物分析
结题年份:
2016
批准年份:
2014
项目状态:
已结题
项目参与者:
谢宝平、慈薇、杨春莉、马豫峰、徐小英、舒阳
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中文摘要
内毒素诱发脓毒症是导致危重患者死亡的重要原因。内毒素水平是脓毒症病情诊断的重要指标。本项目拟建立基于微流控芯片的在线快速、准确、高通量测定全血中内毒素含量的新方法。通过含特异性捕捉内毒素配基的内置捕集膜芯片,完成临床血样中内毒素的在线选择性捕集。选择自身无荧光的重组因子C作为内毒素荧光标记物,采用多种富集方法提高检测灵敏度,使用荧光倒置显微镜实时观测分析过程。使用荧光显微镜观查异硫氰酸荧光素标记的内毒素在通道内的吸附情况,评价通道修饰效果。考察内毒素在捕集膜上的吸附效率、作用位点、作用力类型等参数。本项目建立的快速、超微量检测内毒素新方法对脓毒症病情临床诊断、治疗具有重要意义。
英文摘要
Endotoxin can mediate sepsis which is major cause of death of critically ill patients. The levels of endotoxin in the blood are closely related to septic condition. This project will build an online, fast, accurate and high-throughput new determination method of whole blood endotoxin content based on a Microfluidic Chip. The endotoxin in blood will be selectively captured by fabricating sandwich-type membrane chip and membrane chip modified by specific capture endotoxin ligands. rFC without fluorescence is choosen as fluorescent reagents of endotoxin. Various sample preconcentration methods are adopted to improve detection sensitivity of microfluidic chip. The analysis processes are observed by using inverted fluorescence microscope. Manual error and contamination induced by offline sample pretreatment will be effectively avoided, and sample-in-answer-out will be achieved. Some parameters, such as adsorption efficiency of endotoxin, endotoxin-ligands interaction sites, the types of interaction forces, will be investigated. Using computer-aided design imitates interaction between ligands and endotoxin. All parameters obtained will provid a theoretical support for new method.The basic application will be investigated by online monitoring endotoxin levels of blood samples of CLP model rats using polymyxin B as a model drug. It is of extremely vital significance for clinical diagnosis and treatment of sepsis according to endotoxin content determined using the fast, ultra-trace detection new method.
内毒素诱发脓毒症是导致危重患者死亡的重要原因。内毒素水平是脓毒症病情诊断的重要指标。本项目建立了基于微流控芯片的在线快速、高通量在线测定全血中内毒素含量的新方法。采用10%的牛血清蛋白修饰PDMS芯片表面,改善亲水性,减少内毒素在PDMS表面的吸附。利用壳聚糖和多粘菌素B制备捕集膜,特异性捕集样品中内毒素分子。采用具有聚集诱导荧光的(AIE)探针分子标记内毒素,有效的减少了探针分子本身对测定的干扰。由于样品中内毒素含量很低,因此发展在线富集技术是关键步骤。基于微流控芯片技术,我们探究了阴离子选择性富集膜对内毒素的在线富集效果,结果较满意。同时,本研究优化了多种在线富集方法,主要有场强放大、胶束解聚、扫集富集及pH连接等多种富集方法连用。本项目建立的多种在线富集方法对生物样本中微量超微量组分分析检测有重要的实用价值,快速、超微量检测内毒素新方法对脓毒症病情临床诊断、治疗具有重要意义。
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专利列表
Combination of micelle collapse and field-amplified sample stacking in capillary electrophoresis for determination of trimethoprim and sulfamethoxazole in animal-originated foodstuffs
结合毛细管电泳中的胶束崩塌和场放大样品堆积来测定动物源性食品中的甲氧苄啶和磺胺甲恶唑
DOI:10.1016/j.foodchem.2016.09.118
发表时间:2017-03-15
期刊:FOOD CHEMISTRY
影响因子:8.8
作者:Liu, Lihong;Wan, Qian;Yang, Chunli
通讯作者:Yang, Chunli
DOI:10.1016/j.foodchem.2014.12.054
发表时间:2015-06-01
期刊:FOOD CHEMISTRY
影响因子:8.8
作者:Xu, Xiaoying;Liu, Lihong;Shu, Yang
通讯作者:Shu, Yang
DOI:10.1016/j.jchromb.2014.12.009
发表时间:2015-02
期刊:Journal of chromatography. B, Analytical technologies in the biomedical and life sciences
影响因子:--
作者:Xiaoying Xu;Zhimin Jia;Yang Shu;Lihong Liu
通讯作者:Xiaoying Xu;Zhimin Jia;Yang Shu;Lihong Liu
DOI:10.1016/j.jpba.2015.12.021
发表时间:2016-02
期刊:Journal of pharmaceutical and biomedical analysis
影响因子:3.4
作者:Lihong Liu;Xiaoying Xu;Yanhui Liu;Xuanxuan Zhang;Lin Li;Zhimin Jia
通讯作者:Lihong Liu;Xiaoying Xu;Yanhui Liu;Xuanxuan Zhang;Lin Li;Zhimin Jia
Study of individual erythrocyte deformability susceptibility to INFeD and ethanol using a microfluidic chip.
使用微流控芯片研究个体红细胞变形对 INFeD 和乙醇的敏感性
DOI:10.1038/srep22929
发表时间:2016-03-11
期刊:Scientific reports
影响因子:4.6
作者:Liu L;Huang S;Xu X;Han J
通讯作者:Han J
Ap-Exo III 联合模式识别构建降尿酸药
物筛选新方法的研究
- 批准号:--
- 项目类别:省市级项目
- 资助金额:10.0万元
- 批准年份:2025
- 负责人:刘利红
- 依托单位:
基于DNaseI-Ap-GO联合多靶标平行在线富集微流控芯片的原发性肝癌早期诊断新方法研究
- 批准号:--
- 项目类别:省市级项目
- 资助金额:10.0万元
- 批准年份:2021
- 负责人:刘利红
- 依托单位:
基于集成微流控芯片的血小板功能检测新方法研究
- 批准号:81973282
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:55.0万元
- 批准年份:2019
- 负责人:刘利红
- 依托单位:
基于毛细管电泳柱端微反应器筛选HIV gp41融合抑制剂的研究
- 批准号:30901826
- 项目类别:青年科学基金项目
- 资助金额:20.0万元
- 批准年份:2009
- 负责人:刘利红
- 依托单位:
国内基金
海外基金
