Wilson病蛋白功能及其发病机制的研究

Wilson病（WD）是与铜代谢障碍有关的常染色体隐性遗传病，主要表现为肝肾损害、锥外系症状和角膜K-F环。WD基因编码ATP7B蛋白，其影响铜代谢的具体机制尚不清楚。本项目将应用基因定点诱变及克隆筛查、稳定转染细胞系、多重免疫荧光共聚焦显微镜分析、细胞亚单位分离及标记、放射硫标记及免疫共沉淀等多种前沿的细胞和分子生物学技术,立足我们前期有关中国人WD研究中的重要发现，选择最具代表意义的突变类型，分别构建相应的稳定转染细胞系；研究和比较正常ATP7B蛋白及其突变体蛋白的细胞内定位和功能，阐明其参与铜转运过程的具体机制和环节；在此基础上，寻找并鉴定ATP7B蛋白的结合蛋白，研究其特点和功能，及其与ATP7B突变体蛋白的互动关系。本项研究对彻底揭示WD的分子发病机制具有重要意义，并将大大拓展WD的研究领域，为后续有针对性的基因治疗研究奠定基础，同时也为其他代谢性遗传病的研究提供方法和新思路。