新方法分离、鉴定胰腺癌肿瘤干细胞和其相关生物学特性研究

根据中期进展报告，课题后期做了相应调整，取得主要成果如下：.1、我们利用SW1990耐药株在化疗药物刺激前后及NF-kappaB p65敲除前后用同样的化疗药物进行刺激后的相关表型，CD24+CD44+和CD133+细胞比例及vimentin和E-cadherin的变化。结果发现在SW1990耐药株中，吉西他滨刺激可以导致细胞内干细胞样细胞比例及EMT相关标志物的升高，NF-kappaB p65敲除后可以阻断这种现象的发生。同时我们发现在阴性对照组中CD24+CD44+和CD133+细胞比例显著高于正常对照组。首次发现在SW1990耐药株中上皮间质转化与胰腺癌CD24+CD44+和CD133+细胞存在相关性。EMT与肿瘤干细胞样细胞在胰腺癌中可能存在相关性。不同水平的EMT可以诱导出相应比例的干细胞样细胞。.2、我们选取了41病理确诊为胰腺导管腺癌的病理切片，分别检测EMT的相关蛋白：vimentin和E-cadherin，及胰腺癌肿瘤干细胞相关标志物：CD24、CD44和CD133。所得的免疫组化切片在100倍镜下计数阳性细胞数，共计数10个视野，然后取平均值。结果以Pearson分析各个标志物之间的相关性。结果发现在胰腺导管腺癌病例中我们发现vimentin的表达和CD24、CD44和CD133的表达成明显的正相关性。E-cadherin的表达和CD24、CD44和CD133的表达成明显的负相关性。而作为参照的vimentin和E-cadherin 也存在着明显的负相关性。我们发现EMT相关标志物和胰腺癌肿瘤干细胞标志物在胰腺导管腺癌标本内存在着显著的的相关性。Vimentin、E-cadherin和CD24、CD44、CD133存在着明确的相关性。EMT与肿瘤干细胞在胰腺癌中可能存在着密切的联系。