宫颈癌在我国妇女恶性肿瘤中排第二位，每年新增约13万病例。凋亡相关基因-2（ALG-2）既可诱导细胞死亡，又可促进细胞增生，在多种途径诱导的细胞死亡信号通路中起着重要作用。本项目研究对ALG-2基因两个Tag SNPs位点（rs3756712及rs4957014），在328例宫颈癌患者及541例健康对照者中进行了群体遗传学研究，发现上述两个SNP位点与宫颈癌密切相关。采用变性高效液相色谱法（DHPLC）对ALG-2/Alix基因进行了全面的突变筛查，在宫颈癌患者组中新发现ALG-2基因突变位点：ALG-2基因 C191T突变，导致蛋白苏氨酸64异亮氨酸突变。qPCR以及Western Blot结果表明，ALG-2 mRNA和蛋白在宫颈癌组织中均降低。构建了基于液相芯片分析系统LiquiChip 200平台，检测血清ALG-2蛋白表达的实验技术方法与相应的检测试剂盒，发现宫颈癌组中血清ALG-2蛋白显著降低。克隆ALG-2基因后，构建了ALG-2/pEGFP-C1野生型及ALG-2 C191T/pEGFP-C1突变型重组表达质粒，构建了特异性针对ALG-2基因的siRNA，分别转染HeLa细胞。课题组选择了22个重要的基因，采用ROCHE公司的Universal ProbeLibrary探针法，检测上述基因mRNA表达，发现siRNA组Fas基因表达显著下调，而野生型ALG-2质粒组中Fas基因表达显著上调；ALG-2 C191T基因突变导致Fas及RAF1基因表达显著上调，而DAPK1及PTPN23基因表达则显著下调。本研究达到了预期目标：首次从群体遗传学研究、DNA遗传变异筛查及突变功能研究、组织中mRNA与蛋白表达以及血清蛋白浓度检测等多个角度证实ALG-2与宫颈癌的发生发展密切相关；siRNA抑制ALG-2表达或转染ALG-2质粒增强其表达后，均显著影响Fas基因表达；在宫颈癌患者中新发现ALG-2基因突变位点ALG-2 C191T，该突变影响Fas、RAF1、DAPK1及PTPN23等基因表达；首次构建了采用液相芯片技术检测血清ALG-2蛋白的方法与试剂盒，发现宫颈癌患者中血清ALG-2显著降低。本项目研究的顺利完成，为宫颈癌发病机制研究、ALG-2及相关基因的深入研究以及ALG-2在宫颈癌中的转化应用研究等奠定了基础。