基于DNA损伤基因和HCR机制的环境污染物致癌活性快速检测系统的研究

本研究针对环境致癌物具有致癌过程复杂、多种痕量污染物同时存在的特点，但目前缺乏可同时检测DNA损伤与DNA修复功能方法的现状，在本实验室已建立的可用于检测DNA损伤的细胞筛选技术的研究基础上，基于宿主细胞恢复活性（HCR）试验原理，构建一种基于双荧光素酶的环境化学物致癌活性的真核细胞快速筛选系统。本系统采用双荧光素酶标记，可同时检测环境污染物对细胞DNA损伤和修复能力的影响。通过双荧光素酶互为内对照、两通道单光子计数仪、增加大分子物质的检出率等技术，提高本系统检测的稳定性和灵敏度。结合GC-MS对环境污染物的定量测定，建立环境污染物浓度-DNA损伤修复-致癌强度指数关系，建立一种可以快速综合评价环境致癌物质致癌危险的真核筛选方法，可快速准确地评价单个及多种环境致癌物的综合致癌危险性，为环境致癌物的快速筛选提供了一种新方法。同时所建立的方法也可用于新药开发和药物筛选。