目前发现CD4+CD25+调节性T细胞对于器官移植免疫耐受形成有重要作用，本研究通过获取供体小鼠角膜抗原，联合受体树突状细胞以及IL-2等，共同作用于受体外周淋巴细胞，建立受体小鼠CD4+CD25+T细胞体外培养扩增体系并进行分离，检测其纯度，细胞存活率及特异性免疫抑制功能。进而将获得的细胞进行冷冻复苏，观察其数量和功能变化。分别将新鲜获得和经过冷冻保存的细胞采用结膜下注射或尾静脉注射过继转移给正常同种异体受体小鼠，用绿色荧光蛋白标记的腺病毒转染注射细胞研究其在局部和全身的转归情况以及受体免疫功能变化。通过建立小鼠高危角膜移植动物模型，观察局部和全身注射供体抗原特异性调节性T细胞对植片存活时间的影响，检测迟发性超敏反应明确受体免疫耐受状态，检测植片、房水、外周血和脾脏中免疫细胞和细胞因子的变化明确调节性T细胞相关作用机制，为高危角膜移植的防治提供新的手段。