泛素连接酶（E3）如何将底物泛素化信息传递给蛋白酶体是蛋白质泛素化研究的一个核心问题。HECT类E3 Smurf1在骨稳态维持中具有重要调控功能，我们近期鉴定了其辅因子CKIP-1，并揭示了CKIP-1靶向其WW连接区激活E3活性、催化底物泛素化修饰的新机制。但是被Smurf1泛素化修饰的底物如何进一步被蛋白酶体特异识别并降解尚未揭示，整个HECT类E3与蛋白酶体的关系也很不清楚。通过酵母双杂交筛选，我们发现蛋白酶体基底复合物的ATPase亚基Rpt6可特异结合Smurf1及CKIP-1，本项目将利用泛素化、蛋白质降解、蛋白质相互作用分析等技术，揭示Smad1/5等重要底物被Smurf1泛素化修饰完成后被蛋白酶体识别的机制及Rpt6、CKIP-1在其中的作用。研究将首次建立Smurf/Nedd4家族E3与蛋白酶体之间的特异识别机制，系统揭示Smurf1调控骨形成的分子生物学事件。