课题基金基金详情
石斑鱼新型摄食因子的克隆鉴定及其对肌肉糖代谢的调控作用
结题报告
批准号:
31072194
项目类别:
面上项目
资助金额:
38.0 万元
负责人:
李文笙
依托单位:
学科分类:
C1901.水产学基础
结题年份:
2013
批准年份:
2010
项目状态:
已结题
项目参与者:
吴金英、严爱芬、秦超彬、李瑞芳、王滨、汤治国、林玲
国基评审专家1V1指导 中标率高出同行96.8%
结合最新热点,提供专业选题建议
深度指导申报书撰写,确保创新可行
指导项目中标800+,快速提高中标率
客服二维码
微信扫码咨询
中文摘要
本项目将开展新型摄食因子开胃肽(orexin)对鱼类糖代谢的调控机制研究,在对斜带石斑鱼的orexin及其受体的基因进行克隆、序列分析和基因时空表达特性研究的基础上,制备orexin及相关调控因子的重组蛋白。通过在体和离体试验,从分子水平上探索鱼类摄食因子对糖的代谢和平衡调控机理,阐明石斑鱼orexin与胰岛素样生长因子-I(IGF-I)在肌肉糖代谢过程中的相互作用关系,揭示orexin和IGF-I对糖代谢进行调控的信号传导机制,为鱼类营养学和生理学提供新的内容,为进一步透彻研究鱼类代谢平衡的内分泌机理、更有效调控摄食、提高饵料利用率,降低养殖成本,减少养殖水体中残留饵料,促进鱼类养殖产业向绿色产业发展提供新的理论基础。
英文摘要
食欲素(orexin)是一种由下丘脑分泌的神经调节肽,被认为是一种新型的摄食因子。本研究主要研究结果如下:1).斜带石斑鱼存在两种形式的OX2R全长cDNA序列,命名为gpOX2RL和gpOX2RS。gpOX2RL cDNA全长1440bp,编码一个375氨基酸的七次跨膜蛋白;而gpOX2RS 为新发现的OX2R剪切体,其cDNA全长855bp,编码一个214氨基酸的四次跨膜蛋白。Southern Blot实验结果表明斜带石斑鱼OX2R在基因组中为单拷贝基因。2).斜带石斑鱼orexin及OX2R基因在所检测的神经组织和外周组织中广泛表达,在中枢神经系统高表达,外周组织低表达,表明中枢神经系统是斜带石斑orexin/OX2R发挥其生理功能的主要作用区域。Northern blot研究结果表明,石斑鱼下丘脑中只检测到OX2RS转录本;Western blot研究结果也表明石斑鱼中脑及下丘脑中OX2RS蛋白的相对表达量要高于OX2RL,并且两种OX2R在胚胎发育中可能具有不同的功能。3)斜带石斑鱼下丘脑orexin mRNA存在着明显的昼夜节律,夜间表达量最低,显著性地低于日间表达水平;且orexin mRNA表达量在摄食点显著上升,暗示在石斑鱼中orexin可能作为一个饥饿信号起始摄食。斜带石斑鱼腹腔注射orexin-A能显著促进下丘脑NPY mRNA的表达。离体孵育实验也表明, orexin-A显著性地刺激下丘脑碎片中NPY mRNA的表达。NPY启动子活性实验的研究表明NPY启动子上游1003 bp碱基是orexin调节NPY基因启动子的重要功能区域。4).构建带绿色荧光蛋白标签的重组斜带石斑鱼OX2RL和OX2RS载体,分别转染至293T细胞,证明绿色荧光信号主要定位在细胞膜上。CRE荧光素酶报告基因与真核重组表达载体pcDNA3.1-OX2RL或者pcDNA3.1-OX2RS共转染293T细胞,结果显示OXA结合两种受体不激活PKA信号通路, 但能显著抑制OXA激活的ERK和p38-MAPK信号通路,说明OXA结合两种受体经PLC/PKC通路激活ERK和p38-MAPK信号通路,新型的OX2RS也是功能性受体。orexin对葡萄糖转运、糖酵解和糖异生具有调控作用。投喂实验结果表明orexin重组蛋白可通过增强鱼体对糖类的利用而促进鱼体的生长。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
Genes involved in fatty acid metabolism: Molecular characterization and hypothalamic mRNA response to energy status and neuropeptide Y treatment in the orange-spotted grouper Epinephelus coioides
参与脂肪酸代谢的基因:橙色斑点石斑鱼斜带石斑鱼能量状态和神经肽 Y 治疗的分子特征和下丘脑 mRNA 反应
DOI:10.1016/j.mce.2013.06.020
发表时间:2013-08-25
期刊:MOLECULAR AND CELLULAR ENDOCRINOLOGY
影响因子:4.1
作者:Tang, Zhiguo;Sun, Caiyun;Li, Wensheng
通讯作者:Li, Wensheng
Stimulatory effects of chitinase on growth and immune defense of orange-spotted grouper (Epinephelus coioides).
几丁质酶对橙斑石斑鱼(Epinephelus coioides)生长和免疫防御的刺激作用。
DOI:10.1016/j.fsi.2012.02.009
发表时间:2012-05
期刊:Fish Shellfish Immunol.
影响因子:--
作者:Zhang Y;Feng S;Chen J;Qin C;Lin H;Li W
通讯作者:Li W
DOI:10.1007/s10695-012-9681-6
发表时间:2012-12-01
期刊:FISH PHYSIOLOGY AND BIOCHEMISTRY
影响因子:2.9
作者:Chen, Wenbo;Lin, Haoran;Li, Wensheng
通讯作者:Li, Wensheng
DOI:10.1016/j.pep.2012.04.019
发表时间:2012-07
期刊:Protein expression and purification
影响因子:1.6
作者:Yangyuan Li;Shuge Wu;Ouyang Jing;Limin Mao;Wensheng Li;Hao-ran Lin
通讯作者:Yangyuan Li;Shuge Wu;Ouyang Jing;Limin Mao;Wensheng Li;Hao-ran Lin
UII and UT in grouper: cloning and effects on the transcription of hormones related to growth control
石斑鱼的 UII 和 UT:克隆及其对生长控制相关激素转录的影响
DOI:10.1530/joe-13-0282
发表时间:2014-01-01
期刊:JOURNAL OF ENDOCRINOLOGY
影响因子:4
作者:Sun, Caiyun;Duan, Da;Li, Wensheng
通讯作者:Li, Wensheng
NPY受体介导的罗非鱼免疫应答调控机制研究
  • 批准号:
    32373102
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    50万元
  • 批准年份:
    2023
  • 负责人:
    李文笙
  • 依托单位:
血红素-HO通路在亚硝酸盐胁迫导致的罗非鱼链球菌易感性的机制研究
  • 批准号:
    --
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    58万元
  • 批准年份:
    2020
  • 负责人:
    李文笙
  • 依托单位:
神经内分泌因子生长抑素调控硬骨鱼类生长和糖脂代谢的协同机制研究
  • 批准号:
    31472259
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    88.0万元
  • 批准年份:
    2014
  • 负责人:
    李文笙
  • 依托单位:
鱼类新型细胞因子Adiponectin和受体的分子克隆及其对糖脂代谢的调控机制
  • 批准号:
    31272639
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    80.0万元
  • 批准年份:
    2012
  • 负责人:
    李文笙
  • 依托单位:
石斑鱼摄食因子的基因克隆、表达及其对脂肪代谢的调控作用
  • 批准号:
    30671626
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    27.0万元
  • 批准年份:
    2006
  • 负责人:
    李文笙
  • 依托单位:
国内基金
海外基金