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高致病性囊泡病毒HvAV-3h的DNA复制、演化及其传播机制研究
结题报告
批准号:
31371995
项目类别:
面上项目
资助金额:
78.0 万元
负责人:
黄国华
依托单位:
学科分类:
C1406.生物防治
结题年份:
2017
批准年份:
2013
项目状态:
已结题
项目参与者:
成小文、曾爱平、王星、何建云、祝玮玮、刘艺妩、李顺姬、朱捷
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中文摘要
囊泡病毒HvAV-3h是最近发现的烟芽夜蛾囊泡病毒(Heliothis virescens ascovirus 3a)中国毒株,其对斜纹夜蛾、甜菜夜蛾、棉铃虫等重要害虫均具有较高的致病性和较快的致死速度,是一种应用前景较好的生防因子。本项目基于生物多样性抑制重要害虫爆发成灾的理念,以高致病性HvAV-3h为研究对象,利用实时荧光定量PCR、脉冲场凝胶电泳、Southern Blot等技术研究HvAV-3h基因组DNA复制机制;基于进化生物学理论对其基因组变异区和复制起点序列等进行权重赋值,研究囊泡病毒的系统发育关系,阐明 HvAV-3的演化历程;深入研究HvAV-3h在宿主间的传播机制,明确其在"HvAV-3h-斜纹夜蛾-淡足侧沟茧蜂"系统中的作用和地位。为维持该系统在农业生态系中的微平衡、构建针对斜纹夜蛾等重要鳞翅目害虫的高效绿色防控技术体系提供理论基础和科学依据。
英文摘要
Ascovirus HvAV-3h recently discovered is a Chinese variant of Heliothis virescens ascovirus 3a. As a potential biocontrol factor, it has high pathogenicity and faster killing speed to Spodoptera litura, Spodoptera exigua, Helicoverpa armigera and so on, refer to as the important insect pests. This project is designed on basis of the conception using biodiversity to prevent the important insect pests' outbreak and disaster. Firstly, this project targets HvAV-3h by using real-time quantitative PCR, Pulsed Field Gel Electrophoresis (PFGE), Southern Blot and so on to study the DNA replication mechanism of HvAV-3h. Secondly, In order to understand the evolutionary path of HvAV-3h, phylogenetic relationships of ascovirid strains were analysized based on the genome sequences with weight assignment of the genome variable region and sequences of the original of replication according to biological evolutionism. Thirdly, the propagation mechanism of HvAV-3h among its intermediate hosts and (final) hosts is studied to systematically illuminate the role and position of HvAV-3h in the system "HvAV-3h - Spodoptera litura - Microplitis pallidipes". This will provide a theoretical foundation and scientific basis for maintaining the balance of the system in the agricultural ecosystem and building an efficient green prevention and control technology system to the important lepidopteran pests such as Spodoptera litura.
本项目针对国家实施“一控两减”战略的需求,研发应用前景较好的生防因子,基于对斜纹夜蛾、甜菜夜蛾、棉铃虫等重要害虫均具有较高致病能力和较快致死速率的烟芽夜蛾囊泡病毒3h株(HvAV-3h),开展系统研究工作。以HvAV-3h感染SeEI、Sf9细胞系,通过对其感染效率和基因组拷贝数的时序动态研究,明确了病毒基因组DNA的“阶段式”复制方式;通过TEM和SEM检测了病毒粒子形态特征、454测序测定了全基因组序列,分析了HvAV-3h的基因组特征及其变异区域,并分别以MCP、DNA Polymerase以及62个核心基因的氨基酸序列开展其与近缘毒株的系统发育关系分析,揭示了烟芽夜蛾囊泡病毒3h株起源于美国的3f株,随后扩散至澳大利亚、印度尼西亚和美国,演化出3g、3e和3i株的演化历程。基于LC-MS/MS技术分析了HvAV-3h的蛋白质组学特征。进一步阐明了HvAV-3h毒株对三种重要农业害虫的致病致死规律,明确了HvAV-3h依赖于斯氏侧沟茧蜂等寄生蜂的产卵行为在斜纹夜蛾、棉铃虫等宿主幼虫个体间进行机械传播的流行致病特点。项目研究成果对昆虫囊泡病毒的地理分布、物种演化、流行致病等研究领域起到了较大的推动作用,为维持农业生态系中的微平衡、构建针对斜纹夜蛾与棉铃虫等重要鳞翅目害虫的高效绿色防控技术体系提供了理论基础和科学依据。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
Selection and validation of reference genes for RT-qPCR analysis in Sf9 cell line infected by Heliothis virescens ascovirus 3h (HvAV-3h)
在烟芽夜蛾子囊病毒 3h (HvAV-3h) 感染的 Sf9 细胞系中选择和验证用于 RT-qPCR 分析的参考基因
DOI:10.1016/j.aspen.2017.03.008
发表时间:2017-06
期刊:Journal of Asia-Pacific Entomology
影响因子:1.5
作者:Zi-Shu Chen;Ning-Ning Han;Jian-Hong Li;Hu Wan;Guo-Hua Huang
通讯作者:Guo-Hua Huang
DOI:10.1093/ee/nvx076
发表时间:2017-04
期刊:Environmental Entomology
影响因子:1.7
作者:Chen Xu-Yang;Hopkins R. J.;Zhao Yi-Pei;Huang Guo-Hua
通讯作者:Huang Guo-Hua
Imperfection works: Survival, transmission and persistence in the system of Heliothis virescens ascovirus 3h (HvAV-3h), Microplitis similis and Spodoptera exigua.
不完美作品:烟夜蛾子囊病毒 3h (HvAV-3h)、类似小蝇和甜菜夜蛾系统中的存活、传播和持久性
DOI:10.1038/srep21296
发表时间:2016-02-16
期刊:Scientific reports
影响因子:4.6
作者:Li SJ;Hopkins RJ;Zhao YP;Zhang YX;Hu J;Chen XY;Xu Z;Huang GH
通讯作者:Huang GH
Genome sequence and organization analysis of Heliothis virescens ascovirus 3f isolated from a Helicoverpa zea larva
从玉米夜蛾幼虫中分离的烟夜蛾子囊病毒 3f 的基因组序列和组织分析
DOI:10.1016/j.jip.2014.08.003
发表时间:2014
期刊:Journal of Invertebrate Pathology
影响因子:3.4
作者:Wei Yong-Lu;Hu Jue;Li Shun-Ji;Chen Zi-Shu;Cheng Xiao-Wen;Huang Guo-Hua
通讯作者:Huang Guo-Hua
Selection of reference genes for expression analysis using RT-qPCR in the dissemination system of Heliothis virescens ascovirus 3 h (HvAV-3h).
在烟夜蛾子囊病毒 3 h (HvAV-3h) 传播系统中使用 RT-qPCR 选择内参基因进行表达分析
DOI:10.1038/s41598-017-07684-w
发表时间:2017-08-01
期刊:Scientific reports
影响因子:4.6
作者:Chen ZS;Han NN;Li JH;Huang GH;Wan H
通讯作者:Wan H
昆虫病原微生物资源挖掘与利用学术研讨会
  • 批准号:
    32281340018
  • 项目类别:
    --
  • 资助金额:
    20万元
  • 批准年份:
    2022
  • 负责人:
    黄国华
  • 依托单位:
烟芽夜蛾囊泡病毒3h株干扰宿主细胞周期的分子机制
  • 批准号:
    31872027
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    59.0万元
  • 批准年份:
    2018
  • 负责人:
    黄国华
  • 依托单位:
谷蛾科的分子系统发育及几大重要害虫的快速鉴定
  • 批准号:
    30800710
  • 项目类别:
    青年科学基金项目
  • 资助金额:
    21.0万元
  • 批准年份:
    2008
  • 负责人:
    黄国华
  • 依托单位:
国内基金
海外基金