自噬小体标记蛋白LC3-II荧光衍生物的半合成及调控细胞自噬机理的研究

细胞自吞噬（autophage）对于维持细胞的正常生理功能，细胞内环境的动态平衡及分化与发育具有十分重要的意义,而自噬小体标记蛋白LC3-II则一直被认为是自吞噬发生、发展的生物靶标。本项目通过发展新型蛋白质化学合成及标记的方法，成功运用半合成策略得到了具有较高均一性和纯度的荧光标记的LC3-II，为进一步深入研究自噬发生的机理打下基础。具体成果为：一. 运用羟基酸定点嵌入蛋白质的策略发展出新一代蛋白质半合成策略；二. 结合thiol-ene/yne类生物正交反应及非天然氨基酸定点嵌入技术发展出新型蛋白质定点标记及修饰方法；三. 采用光保护的辅助Arg-Tag的策略，通过半合成得到了C端为磷脂肽的极度憎水的细胞自噬蛋白LC3Ⅱ，该蛋白是细胞启动自吞噬过程的标志，具有重要的生物学意义。理、化实验进一步证实了合成蛋白结构与功能的正确性。该方法的建立同时为为难溶性脂蛋白的化学合成提供了一种新思路。