多形性胶质母细胞瘤中存在仅占极少一部分特殊细胞亚群—胶质瘤干细胞(GSCs)，具有高度的侵袭、转移及耐放化疗等特性，被认为是肿瘤的复发与治疗抵抗的根源。近年研究显示自然杀伤（NK）细胞具有抗肿瘤效应，激活后的NK细胞高表达PD1受体( programmeddeath-1，PD1)，胶质瘤干细胞高表达 PD1配体（programmed death ligand-1,又称B7H1）分子，有关 PD1/ B7H1 信号通路是否参与调控NK细胞介导的对胶质瘤的的免疫应答的研究尚未见报道。.本研究利用免疫组化与流式细胞术分析B7H1与PD1分子在胶质瘤组织和肿瘤浸润NK细胞上的表达。将免疫磁珠纯化的人源性异体hNK，通过 IL-2 激活，与分离纯化的人原代胶质瘤干细胞（hGSCs）共培养，通过活细胞免疫荧光示踪技术，检测hNK细胞与hGSCs形成的免疫突触和粘附率，利用流式细胞术检测效应细胞的脱颗粒水平。同时结合Annexin V-FITC/PI双染进行凋亡检测、乳酸脱氢酶（LDH）释放试验检测hNK细胞对hGSCs的杀伤水平。利用 NOD/SCID小鼠构建hGSCs皮下移植瘤模型，鉴定hGSCs的致瘤性。将体外培养hNK细胞多靶点浸润注射于移植瘤瘤内，观察hNK细胞在体内对hGSCs的杀伤功能。 为了进一步观察PD1/B7H1通路对NK细胞在体内杀伤GSCs的调节作用，我们从小鼠胶质瘤细胞系GL261中分离纯化出小鼠胶质瘤干细胞GL261GSCs，构建GL261GSCs的小鼠颅内同种移植瘤模型，给予以小鼠NK（mNK）细胞为主体的过继免疫治疗，通过小动物核磁成像观察mNK细胞对小鼠颅内肿瘤生长的抑制作用。.结果显示：（1）胶质母细胞瘤及GSCs高度表达B7H1分子；（2）IL-2激活的NK细胞其PD1分子的表达水平上调，并且具有杀伤GSCs的活性；（3）单克隆抗体可以阻断NK细胞PD1分子与阻碍靶细胞表面的B7H1分子结合，促进NK细胞对GSCs的杀伤；（4)裸鼠移植瘤动物实验提示，抗 PD1单克隆抗体阻断可以增强NK细胞对肿瘤生长抑制。(5)过继免疫治疗GL261GSCs小鼠颅内移植瘤模型的实验提示， 经抗PD1单克隆抗体阻断的小鼠NK细胞可以有效的抑制荷瘤小鼠颅内肿瘤的生长，延长小鼠的生存期。 .结论： PD1/B7H1信号通路参与负性调控NK细胞对GSCs的杀伤效应。