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一种检测结核分枝杆菌抗原标志物的方法学研究——基于signal-on型电化学适体检测体系的构建及应用
结题报告
批准号:
81601856
项目类别:
青年科学基金项目
资助金额:
17.0 万元
负责人:
白丽娟
依托单位:
学科分类:
H2606.检验医学研究新技术与新方法
结题年份:
2019
批准年份:
2016
项目状态:
已结题
项目参与者:
李岱容、张普、衣启营、赵一璘、牛亚珍、陈俊
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中文摘要
结核病是严重危害人类健康的慢性传染病,但现有的结核诊断方法存在繁琐耗时、仪器昂贵、灵敏度和特异性低等缺陷。Signal-on型电化学适体传感器具有简便快速、成本低、灵敏度高、选择性好等优点,但对于目标分析物的结合位点和亲合适体数量均有要求,因而其应用受限。本项目拟以结核分枝杆菌(MTB)抗原标志物为研究对象,通过合理设计适体及相应探针序列而将信号转换与生物放大技术有机结合,提高传感器的适用性并实现目标物的循环放大;首次设计制备性能优异的酶标记C60-PANI复合物用于检测信号的产生及多重放大;采用SPE阵列技术实现MTB抗原的高通量检测;从而建立一种敏感特异、高效快速的signal-on型电化学适体检测新方法用于临床样本中多种MTB抗原标志物(如CFP10、ESAT6、Ag85等)的联合检测,为结核病的早期诊断提供创新性的技术平台。
英文摘要
Tuberculosis is a chronic infectious disease which seriously imperils health of human beings. However, the present methods for tuberculosis diagnosis have the defects of complicated time consuming, expensive equipment, low sensitivity and poor specificity. Signal-on electrochemical aptasensors have the advantages of simple operation, high sensitivity, low cost and good selectivity. However, these aptasensors have the requirements of target binding sites and number of binding aptamers, which limits its application. This project intends to take Mycobacterium tuberculosis (MTB) antigen as the research object and organically combine the signal conversion with biological amplification technology through the reasonable design of base sequence of aptamers and the corresponding probes. Then the general versatility of the aptasensor and target-cycling amplification will be realized. The enzyme labeled C60-polyaniline (C60-PANI) with excellent performance are prepared and used for the generation and multiplex amplification of the detection signal for the first time. And on this basis, high throughput detection of MTB antigens would be achieved combined with screen-printed electrode (SPE) array technology. Thereby, a new and versatile signal-on elctrochemical aptamer detection method with high sensitivity and specificity, good stability and rapid response, will be established for the combined detection a variety of MTB antigen markers (such as CFP10, ESAT6, Ag85, etc), which provides an innovative technology platform for the early diagnosis of tuberculosis.
结核病是由结核分枝杆菌(MTB)感染引起的慢性传染病,致死率高、危害大,但现有的结核诊断方法存在繁琐耗时、仪器昂贵、灵敏度和特异性低等缺陷。电化学适体传感器具有简便快速、成本低、灵敏度高、选择性好等优点,但对于目标分析物的结合位点和亲合适体数量均有要求,因而其应用受限。本项目以结核分枝杆菌(MTB)抗原标志物(MPT64、CFP10、ESAT6)和MTB插入序列6110的特异性DNA为研究对象,通过合理设计适体及相应探针序列而将信号转换与生物放大技术有机结合,提高传感器的适用性并实现目标物的循环放大;设计制备多种性能优异的复合纳米材料用于检测信号的产生及多重放大;临床样本检测,并与现有的临床测试方法进行对照,从而建立一种敏感特异、高效快速的MTB电化学适体检测新方法,为结核病的早期诊断提供创新性的技术平台。相关研究成果在Biomaterials(IF=10.273)、Biosensors and Bioelectronics(IF=9.518)、Sensors and Actuators B: Chemical(IF=6.393)等国际知名学术期刊发表SCI论文11篇,累计影响因子IF大于70。申请国家发明专利4项,其中1项已授权。
期刊论文列表
专著列表
科研奖励列表
会议论文列表
专利列表
Aptamer based voltammetric biosensor for Mycobacterium tuberculosis antigen ESAT-6 using a nanohybrid material composed of reduced graphene oxide and a metal-organic framework
基于适体的伏安生物传感器,用于结核分枝杆菌抗原 ESAT-6,使用由还原氧化石墨烯和金属有机框架组成的纳米混合材料
DOI:10.1007/s00604-018-2884-5
发表时间:2018-08-01
期刊:MICROCHIMICA ACTA
影响因子:5.7
作者:Li, Linlin;Yuan, Yonghua;Bai, Lijuan
通讯作者:Bai, Lijuan
A polyaniline-reduced graphene oxide nanocomposite as a redox nanoprobe in a voltammetric DNA biosensor for Mycobacterium tuberculosis
聚苯胺还原氧化石墨烯纳米复合材料作为结核分枝杆菌伏安法 DNA 生物传感器中的氧化还原纳米探针
DOI:10.1007/s00604-017-2184-5
发表时间:2017-06-01
期刊:MICROCHIMICA ACTA
影响因子:5.7
作者:Chen, Yuhan;Li, Youlun;Bai, Lijuan
通讯作者:Bai, Lijuan
Amperometric DNA biosensor for Mycobacterium tuberculosis detection using flower-like carbon nanotubes-polyaniline nanohybrid and enzyme-assisted signal amplification strategy
使用花状碳纳米管-聚苯胺纳米杂化物和酶辅助信号放大策略检测结核分枝杆菌的电流DNA生物传感器
DOI:10.1016/j.bios.2018.08.023
发表时间:2018-11-15
期刊:BIOSENSORS & BIOELECTRONICS
影响因子:12.6
作者:Chen, Yuhan;Guo, Shuliang;Bai, Lijuan
通讯作者:Bai, Lijuan
An amperometric aptasensor for ultrasensitive detection of sulfadimethoxine based on exonuclease-assisted target recycling and new signal tracer for amplification
基于核酸外切酶辅助靶标回收和新型放大信号示踪剂的超灵敏检测磺胺二甲氧嘧啶的安培适配体传感器
DOI:10.1016/j.bios.2018.06.011
发表时间:2018-10-15
期刊:BIOSENSORS & BIOELECTRONICS
影响因子:12.6
作者:You, Huan;Bai, Lijuan;Mu, Zhaode
通讯作者:Mu, Zhaode
An electrochemical aptasensor for highly sensitive detection of zearalenone based on PEI-MoS2-MWCNTs nanocomposite for signal enhancement
基于 PEI-MoS2-MWCNTs 纳米复合材料信号增强的电化学适体传感器,用于高灵敏度检测玉米赤霉烯酮
DOI:10.1016/j.aca.2019.02.012
发表时间:2019
期刊:Analytica Chimica Acta
影响因子:6.2
作者:Ma Luyao;Bai Lijuan;Zhao Min;Zhou Jing;Chen Yongjie;Mu Zhaode
通讯作者:Mu Zhaode
基于液滴数字光控 CRISPR 的结核分枝杆菌核酸单分子检测新方法研究
  • 批准号:
    --
  • 项目类别:
    省市级项目
  • 资助金额:
    0.0万元
  • 批准年份:
    2025
  • 负责人:
    白丽娟
  • 依托单位:
基于功能化Ni6MnO8@C60纳米探针和无酶核酸信号放大的癌症血清标志物检测新方法研究
  • 批准号:
    82072378
  • 项目类别:
    面上项目
  • 资助金额:
    55万元
  • 批准年份:
    2020
  • 负责人:
    白丽娟
  • 依托单位:
国内基金
海外基金