新城疫病毒I 系苗(Mukteswar)的进化及其毒力增强的分子机制

批准号:
31172338
项目类别:
面上项目
资助金额:
55.0 万元
负责人:
刘晓文
依托单位:
学科分类:
C1802.兽医病毒学
结题年份:
2015
批准年份:
2011
项目状态:
已结题
项目参与者:
刘秀梵、胡顺林、王晓泉、胡增垒、宋庆庆、王郁扬、开妍、段志强、朱杰
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中文摘要
前期研究中获得了I系苗Mukteswar的毒力增强毒株JS/7/05/Ch,但其毒力增强的原因目前还尚不清楚。为了研究I系苗毒力增强的分子机制,本项目将对I系苗及其强毒株的全基因组序列和致病性进行分析,系统研究它们各基因的遗传变异、结构蛋白氨基酸的位点差异以及致病性差异。同时以I系苗经鸡体内反复传代,测定不同代次毒株的生物学特性及基因组序列,研究鸡体内I系苗基因进化与毒力变异之间的关系。利用反向遗传技术构建Mukteswar全基因组cDNA感染性克隆,将强毒株JS/7/05/Ch变异基因分别或同时替换到Mukteswar全长基因组中,并进行突变株的拯救,通过突变株的细胞感染试验和动物致病试验,分析引起I系苗毒力变化的关键基因及氨基酸位点,最终确定决定I系苗毒株毒力增强的基因和氨基酸位点,进而明确I系苗毒力增强的分子机制。
英文摘要
通过评估两株不同毒力的基因III型NDV JS/7/05/Ch株和Mukteswar株在感染4周龄SPF鸡后的脾脏、法氏囊、胸腺和肺脏中病毒的复制能力,以及免疫相关细胞因子的表达情况表明,与Mukteswar相比,JS/7/05/Ch在机体内的高效复制及其诱导的促炎性细胞因子早期的大量表达,是造成机体严重损伤的主要原因。. 通过反向遗传操作成功拯救出了四株NDV。MDT和IVPI测定结果显示拯救的病毒与原始母本病毒相似,但表达JS-7122株HN蛋白病毒的IVPI值要明显高于表达Muk-4株HN蛋白的毒株,结果表明HN基因是Mukteswar株毒力增强的主要分子基础。..基因 Ⅲ 型NDV临床分离株JS/7/05/Ch为典型的强毒,但其基因组却与Ⅰ系苗Mukteswar株具有99%以上的相似性,据此分析该强毒应该由Ⅰ系苗Mukteswar株进化而来。对得到的四株空斑纯化株进行IVPI值的测定。结果显示JS-7122和JS-1217的IVPI值分别是2.2和2.15,而Muk-4和Muk-5的IVPI值分别为0.03和0.09。为了探索影响Mukteswar株NDV毒力增强的关键性基因,我们对JS-7122和Muk-4进行全基因组测序并对所测序列进行比对分析,结果显示两株病毒的差异位点主要集中在NP、HN和L基因上,P、M和F基因则完全一致。NP基因有3个核苷酸的差异,其中第1433nt变异引起氨基酸位点的变化;HN基因有6个核苷酸位点的差异并均引起氨基酸的变化;L基因有5个核苷酸位点的差异,但均未引起氨基酸的突变。通过三维结构模拟可以发现HN蛋白的4个差异位点均在HN蛋白的表面,并且494和495位的氨基酸正处于HN蛋白的抗原表位site12内,我们推测该基因很可能是导致这两株 Ⅲ 型NDV毒力差异主要因素。
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The nucleolar phosphoprotein B23 targets Newcastle disease virus matrix protein to the nucleoli and facilitates viral replication
核仁磷蛋白 B23 将新城疫病毒基质蛋白靶向核仁并促进病毒复制。
DOI:10.1016/j.virol.2014.01.011
发表时间:2014-03-01
期刊:VIROLOGY
影响因子:3.7
作者:Duan, Zhiqiang;Chen, Jian;Liu, Xiufan
通讯作者:Liu, Xiufan
Surveillance of avirulent Newcastle disease viruses at live bird markets in Eastern China during 2008-2012 reveals a new sub-genotype of class I virus.
2008-2012年对华东地区活禽市场无毒新城疫病毒的监测揭示了I类病毒的新亚基因型。
DOI:10.1186/s12985-014-0211-2
发表时间:2014-12-04
期刊:Virology journal
影响因子:4.8
作者:Zhu J;Xu H;Liu J;Zhao Z;Hu S;Wang X;Liu X
通讯作者:Liu X
DOI:--
发表时间:2013
期刊:中国畜牧兽医
影响因子:--
作者:段志强;屠颉;刘晓文;刘秀梵
通讯作者:刘秀梵
DOI:10.1007/s00705-014-2301-2
发表时间:2015-03-01
期刊:ARCHIVES OF VIROLOGY
影响因子:2.7
作者:Hu, Zenglei;Hu, Jiao;Liu, Xiufan
通讯作者:Liu, Xiufan
The M, F and HN genes of genotype VIId Newcastle disease virus are associated with the severe pathological changes in the spleen of chickens.
VIId基因型新城疫病毒的M、F和HN基因与鸡脾脏的严重病理改变有关。
DOI:10.1186/s12985-015-0366-5
发表时间:2015-09-04
期刊:Virology journal
影响因子:4.8
作者:Kai Y;Hu Z;Xu H;Hu S;Zhu J;Hu J;Wang X;Liu X;Liu X
通讯作者:Liu X
基因III型新城疫病毒强毒株HN蛋白与宿主蛋白互作及调控病毒复制机制研究
- 批准号:31873021
- 项目类别:面上项目
- 资助金额:59.0万元
- 批准年份:2018
- 负责人:刘晓文
- 依托单位:
国内基金
海外基金
