非受体酪氨酸激酶c-Abl通过与STAT1直接相互作用调控gamma干扰素应答途径

本项目发现非受体酪氨酸激酶c-Abl与转录因子STAT1蛋白相互作用并通过磷酸化调节其活性。其SH2结构域与STAT1的C端相互作用，并导致STAT1第701位的酪氨酸磷酸化。c-Abl介导的STAT1磷酸化能够调控其同源二聚体的形成、入核、IFNgamma效应基因表达及其介导的抗病毒生物学活性。mRNA表达谱芯片结果表明，在野生型细胞中有159个IFNgamma应答基因表达上调至少2倍，使用c-Abl特异性抑制剂AMN107后，其中有132个基因诱导表达降低。抗原提呈实验发现，当c-Abl 激酶活性受到抑制时，小鼠树突细胞JawsII的MHC-I 类抗原提呈能力显著降低。在细胞水平上，c-Abl能够调控IFNgamma诱导的抗病毒生物学活性以及病毒的增殖能力，对于野生型MEF细胞，随着IFNgamma作用浓度的增加，诱导细胞产生抗VSV病毒能力也逐渐增强，而当c-Abl激酶活性受到抑制或被敲低后，IFNgamma不能有效诱导细胞产生抗病毒活性；同时通过流式细胞术检测GFP荧光强度来评价NDV-GFP在细胞中的增殖能力，发现当c-Abl激酶活性受到抑制时，NDV-GFP在细胞中的增殖能力显著增强，而外源导入c-Abl表达质粒后能在一定程度上抑制病毒增殖。建立T淋巴细胞条件性敲除c-Abl小鼠，利用H1N1小鼠适应病毒株和VSV病毒进行攻击，结果发现与野生型小鼠相比，条件性敲除和灌服AMN107的小鼠存活率均发生下降；VSV病毒感染的野生型小鼠的血清中，免疫应答相关的细胞因子水平显著高于条件性敲除小鼠。上述研究阐明了c-Abl酪氨酸激酶在IFN抗病毒生物学功能中的重要作用，提出了c-Abl参与调控机体免疫系统的可能分子机制。