Sorting Nexin 9 (SNX9)在听毛细胞表皮板中的功能研究

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基本信息

  • 批准号：
    31371355
  • 项目类别：
    面上项目
  • 资助金额：
    70.0万
  • 负责人：
    徐志刚
  • 依托单位：
    山东大学
  • 学科分类：
    C0701.细胞器及亚细胞结构、互作与功能
  • 结题年份：
    2017
  • 批准年份：
    2013
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2014-01-01 至2017-12-31

项目摘要

The cuticular palte is a F-actin-based subcellular structure in auditory hair cells. It occupies the apical cytoplasm of hair cells and serves as an anchor for stereocilia, hence plays an important role in hearing transduction. At present the mechanisms of how this struture is developed and maintained are largely unknown. In previous study we've shown that a WASP-Arp2/3-dependent F-actin regulatory protein, Sorting Nexin 9 (SNX9), is expressed in the cuticular plate of mouse auditory hair cells, and might play an important role in the development and/or maintenance of this structure. We will further investigate the expression patterns of SNX9 and other F-actin regulatory proteins such as WASP and Arp2/3 in the cuticular plate. We will identify SNX9-interacting proetins in hair cells by performing yeast two-hybrid screenings and co-immunoprecipitation, and study the expression and function of some important SNX9-interacting proetins in the cuticular plate. We will also create conditional SNX9 knockout mice and explore the role of SNX9 in the cuticular plate and hearing transduction. This work will help us to further understand the mechanisms of the development and maintainence of the cuticular plate.
表皮板（cuticular plate）是听觉感受器细胞－毛细胞中以F-actin为主体的亚细胞结构，承担了把听纤毛（stereocilia）固定在毛细胞上表面的作用，对听觉传导的发生至关重要。目前人们对调控表皮板发育及维持的机制还不很清楚。申请人发现依赖WASP和Arp2/3的F-actin调控蛋白Sorting Nexin 9 (SNX9) 在小鼠听毛细胞表皮板表达，可能在表皮板的发育或组装中发挥重要作用。我们计划进一步检测SNX9以及WASP、Arp2/3等F-actin调控蛋白在表皮板的表达模式，同时利用酵母双杂交、免疫共沉淀等方法鉴定毛细胞中与SNX9作用的蛋白，并对其中部分重要蛋白在表皮板中的表达和功能进行探索。最后，申请人会构建条件性SNX9基因敲除小鼠，深入探讨SNX9在表皮板发育和维持以及听觉传导中的功能。这一工作将帮助我们进一步认识听毛细胞表皮板发育及维持的机制。

结项摘要

Sorting nexin 9（SNX9）在调控肌动蛋白骨架与细胞膜成管及膜泡形成过程中发挥重要作用。在前期工作中我们发现SNX9在小鼠听觉毛细胞表达，并与FCHSD1协同调控肌动蛋白聚合。在本项目中，我们详细检测了SNX9在毛细胞发育过程中的表达模式，并鉴定了在内耳中表达的SNX9作用蛋白。为进一步深入探讨SNX9的生理功能，我们利用同源重组方法获得了Snx9基因敲除小鼠。Snx9敲除小鼠可以正常存活及繁殖，形态学和行为学方面也与对照小鼠没有差别。进一步研究显示Snx9敲除对听觉毛细胞的形态和功能也没有影响，Snx9基因敲除小鼠的听力水平正常。考虑到FCHSD1与SNX9相互作用并共同调控F-actin聚合，而FCHSD1也在小鼠毛细胞表达，我们计划将Snx9敲除小鼠与Fchsd1敲除小鼠交配，对得到的Fchsd1/Snx9双敲小鼠毛细胞发育、功能及听力水平等进行深入研究。Snx9和Fchsd1基因敲除小鼠的构建和研究对深入认识这两个蛋白在听觉中的生物学功能具有重要意义。

项目成果

期刊论文数量（9）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）
Cyclin I-like (CCNI2) is a cyclin-dependent kinase 5 (CDK5) activator and is involved in cell cycle regulation.
Cyclin I-like (CCNI2) 是一种细胞周期蛋白依赖性激酶 5 (CDK5) 激活剂，参与细胞周期调节
  • DOI：
    10.1038/srep40979
  • 发表时间：
    2017-01-23
  • 期刊：
    Scientific reports
  • 影响因子：
    4.6
  • 作者：
    Liu C;Zhai X;Zhao B;Wang Y;Xu Z
  • 通讯作者：
    Xu Z
Angulin proteins ILDR1 and ILDR2 regulate alternative pre-mRNA splicing through binding to splicing factors TRA2A, TRA2B, or SRSF1.
Angulin 蛋白 ILDR1 和 ILDR2 通过与剪接因子 TRA2A、TRA2B 或 SRSF1 结合来调节选择性前 mRNA 剪接
  • DOI：
    10.1038/s41598-017-07530-z
  • 发表时间：
    2017-08-07
  • 期刊：
    Scientific reports
  • 影响因子：
    4.6
  • 作者：
    Liu Y;Nie H;Liu C;Zhai X;Sang Q;Wang Y;Shi D;Wang L;Xu Z
  • 通讯作者：
    Xu Z
Sorting nexin 9 (SNX9) is not essential for development and auditory function in mice.
分选 nexin 9 (SNX9) 对于小鼠的发育和听觉功能并不重要
  • DOI：
    10.18632/oncotarget.12040
  • 发表时间：
    2016-10-18
  • 期刊：
    Oncotarget
  • 影响因子：
    --
  • 作者：
    Liu C;Zhai X;Du H;Cao Y;Cao H;Wang Y;Yu X;Gao J;Xu Z
  • 通讯作者：
    Xu Z
Leucine repeat adaptor protein 1 interacts with Dishevelled to regulate gastrulation cell movements in zebrafish.
亮氨酸重复接头蛋白 1 与 Disheveled 相互作用调节斑马鱼原肠胚细胞运动
  • DOI：
    10.1038/s41467-017-01552-x
  • 发表时间：
    2017-11-07
  • 期刊：
    Nature communications
  • 影响因子：
    16.6
  • 作者：
    Cheng XN;Shao M;Li JT;Wang YF;Qi J;Xu ZG;Shi DL
  • 通讯作者：
    Shi DL
Loss of CIB2 Causes Profound Hearing Loss and Abolishes Mechanoelectrical Transduction in Mice.
CIB2 缺失会导致小鼠严重听力损失并消除机械电传导。
  • DOI：
    10.3389/fnmol.2017.00401
  • 发表时间：
    2017
  • 期刊：
    Frontiers in molecular neuroscience
  • 影响因子：
    4.8
  • 作者：
    Wang Y;Li J;Yao X;Li W;Du H;Tang M;Xiong W;Chai R;Xu Z
  • 通讯作者：
    Xu Z

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  • 通讯作者：
    徐志刚

其他文献

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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