应用假病毒粒子对猪传染性胃肠炎病毒感染机理的研究

猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)是引起仔猪病毒性腹泻的主要病原体，有严重的临床症状及较高的致死率。Spike(S)基因是该病毒主要抗原保护基因，在感染早期介导病毒粒子与细胞表面受体结合以及随后的病毒囊膜与细胞膜的融合,并决定病毒的致病性和组织嗜性。本实验首先使用水泡性口炎病毒(VSV)制备含有TGEV S蛋白的假病毒粒子。该假病毒粒子表面主要表达TGEV S蛋白，仅能进行一个周期的复制且无传染性，可用来分析S蛋白与宿主细胞之间的相互作用。由于TGEV主要靶细胞是极性分化的表皮细胞，因此我们再用该假病毒感染体外极性化培养的表皮细胞进行病毒感染与受体定位相关性的研究。同时使用激光共聚焦和生物素标记技术定位TGEV受体APN在多种极性化表皮细胞中的表达。最后通过细胞膜脂筏标记物与TGEV S蛋白在细胞膜中的共定位阐明S蛋白与细胞囊膜脂筏(lipid rafts)的关系，进一步探讨TGEV感染机制。