人源整合素蛋白a1亚基，b1亚基的跨膜区延伸至胞内区的液体核磁共振结构生物学研究

结题报告
项目介绍
AI项目解读

基本信息

  • 批准号：
    30970577
  • 项目类别：
    面上项目
  • 资助金额：
    35.0万
  • 负责人：
    田长麟
  • 依托单位：
    中国科学技术大学
  • 学科分类：
    C0501.结构生物学
  • 结题年份：
    2012
  • 批准年份：
    2009
  • 项目状态：
    已结题
  • 起止时间：
    2010-01-01 至2012-12-31

项目摘要

整合素（Integrin）是一类只存在于高等动物细胞中，介导细胞和细胞之间、细胞和基质之间黏附的细胞膜表面受体。整合素由α亚基和β亚基构成跨膜异二聚体。整合素α亚基和β亚基均包含有一个非常大的胞外区，一个单次跨膜的跨膜区和一个铰短的胞内区。整合素蛋白能在细胞膜上进行自内而外，自外而内的双向信号传导。目前的研究集中在整合素蛋白的胞外区，而在自内而外细胞信号传导过程中非常重要的跨膜区和胞内区的研究却并不多见。因此，本项目将应用细菌表达体系，高效表达和纯化整合素蛋白α1亚基的跨膜区延伸到胞内区（transmembrane + cytosolic region, TMC; IntA1-TMC）和β1亚基的跨膜区延伸到胞内区（IntB1-TMC），并应用去污剂胶束来模拟磷脂双分子层环境，应用液体核磁共振方法分别解析IntA1-TMC和IntB1-TMC在去污剂胶束中的三维结构。

结项摘要

在本项目的支持下，按照项目研究计划，我们应用细菌表达体系获得了整合素蛋白IntA1, IntB1的跨膜区和胞内区(IntA1-TMC, IntB1-TMC)的高效表达，并制备了这两个蛋白在去污剂胶束中的液体核磁共振样品。在优化好核磁共振条件后，完成了这两个蛋白的信号归属及其中IntA1-TMC的结构测定。同时，应用核磁共振滴定方法研究了IntA1-TMC与IntB1-TMC的相互作用及界面氨基酸分析。较好地完成了本项目的研究任务。相关的两篇文章一篇已经投稿，正在修回阶段；另一篇正在准备投稿，两篇文章可望在2013年接收和发表。同时，在本项目的依托下，我们进行了膜蛋白液体核磁共振的相关研究方法发展，实现了蛋白质的定点同位素标记，并进一步分析了膜蛋白在细胞膜中的拓扑结构和多结构域蛋白的空间取向问题。相关内容已经有两篇文章发表。.依托本项目，共培养了两名博士研究生和多名本科生。

项目成果

期刊论文数量（2）
专著数量（0）
科研奖励数量（0）
会议论文数量（0）
专利数量（0）

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  • 作者：
    郭晓奇;文明;田长麟;张隆华
  • 通讯作者：
    张隆华

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课题项目：调控A型流感病毒诱导IFN-β表达的机制研究

AI项目摘要：

本研究聚焦于TRIM2蛋白在A型流感病毒诱导的IFN-β表达中的调控机制。A型流感病毒是全球性健康问题，其感染可导致严重的呼吸道疾病。IFN-β作为关键的抗病毒因子，其表达水平对抗病毒防御至关重要。然而，TRIM2如何调控IFN-β的表达尚未明确。本研究假设TRIM2通过与病毒RNA或宿主因子相互作用，影响IFN-β的产生。我们将采用分子生物学、细胞生物学和免疫学方法，探索TRIM2与A型流感病毒诱导IFN-β表达的关系。预期结果将揭示TRIM2在抗病毒免疫反应中的作用，为开发新的抗病毒策略提供理论基础。该研究对理解宿主抗病毒机制具有重要科学意义，并可能对临床治疗流感病毒感染提供新的视角。

AI项目思路：

科学问题：TRIM2如何调控A型流感病毒诱导的IFN-β表达？
前期研究：已有研究表明TRIM2参与抗病毒反应，但其具体机制尚不明确。
研究创新点：本研究将深入探讨TRIM2在IFN-β表达中的直接作用机制。
技术路线：包括病毒学、分子生物学、细胞培养和免疫检测技术。
关键技术：TRIM2与病毒RNA的相互作用分析，IFN-β启动子活性检测。
实验模型：使用A型流感病毒感染的细胞模型进行研究。

AI技术路线图

        graph TD
          A[研究起始] --> B[文献回顾与假设提出]
          B --> C[实验设计与方法学准备]
          C --> D[A型流感病毒感染模型建立]
          D --> E[TRIM2与病毒RNA相互作用分析]
          E --> F[TRIM2对IFN-β启动子活性的影响]
          F --> G[IFN-β表达水平测定]
          G --> H[TRIM2功能丧失与获得研究]
          H --> I[数据收集与分析]
          I --> J[结果解释与科学验证]
          J --> K[研究结论与未来方向]
          K --> L[研究结束]
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